Полезные свойства аллицин


что это такое, где содержится, полезные свойства

В чесноке содержится большое количество полезных компонентов, которые делают его незаменимым продуктом в лечении некоторых заболеваний. Одним из них является аллицин – соединение, образующееся при механическом повреждении луковиц растения.

Что такое аллицин?

Это органическое соединение, которое изначально не присутствует в чесноке. Оно образуется, когда дольки растения подвергаются механическому разрушению (их разрезают, давят, измельчают другим способом).

Вещество представляет собой жидкость без цвета, маслянистой структуры. Именно оно придает продукту тот самый резкий запах и специфический острый вкус. Компонент растворяется в воде, разлагается щелочами. При комнатной температуре он разрушается очень медленно, но при термической обработке – практически мгновенно.

В каких растениях содержится

Основной продукт, в котором образуется действующий компонент – это чеснок. Однако он содержится и в головках лука. При этом его активность будет намного ниже.

В чесноке изначально присутствуют два вещества – аллиин и фермент аллициназа. В тот момент, когда дольки растения подвергают механическому разрушению, эти соединения начинают взаимодействовать друг с другом. В результате этого процесса и образуется аллицин.

Попадая в человеческий организм, вещество вступает в реакцию с эритроцитами. Благодаря этому взаимодействию формируется сероводород, который, в свою очередь, снимает напряжение со стенок сосудов. Это способствует облегчению состояния при скачках давления, улучшает работу сердца, а также головного мозга. Положительный эффект связан и с повышением защитных сил организма.

Полезные свойства

Активное вещество, входящее в состав чеснока, оказывает противовоспалительный, антибактериальный эффект. Оно демонстрирует положительные результаты против разных типов бактерий, вирусов, а также прочих патогенных микроорганизмов. Средство обеззараживает, повышает защитные силы организма. Во многом именно благодаря аллицину чеснок помогает укрепить иммунитет и быстрее вылечить многие простудные заболевания.

Однако помощь в борьбе с простудными болезнями – не единственное положительное свойство органического соединения. Оно приносит следующий эффект:

  1. снижает уровень «вредного» холестерина. За счет чего уменьшает вероятность появления бляшек в сосудах, риск развития атеросклероза и прочих опасных сердечно-сосудистых заболеваний;
  2. стабилизируются показатели давления. Снижается его уровень, поэтому средство эффективно для профилактики болезней, связанных с превышением кровяного давления. Для этого необходимо регулярно принимать повышенные дозы активного компонента;
  3. уменьшается вероятность развития злокачественных новообразований. Действующий компонент является мощным антиоксидантом и препятствует высвобождению свободных радикалов. Снижается риск раковых заболеваний, а при уже существующей болезни замедляется размножение патогенных клеток. К тому же, антиоксидантный эффект позволяет замедлить процессы старения, происходящие в организме.

Средство эффективно для представителей обоих полов. При его употреблении улучшается половая функция у мужчин. Кроме того, биодобавка может использоваться, как средство для профилактики сердечно-сосудистых заболеваний.

Женщины могут принимать БАД в период климакса. Препарат способствует увеличению количества эстрогена и предотвращает развитие остеопороза. Также он уменьшает уровень тестостерона, при котором развивается женское бесплодие.

Allimax, Капсулы с порошком 100%-ного аллицина, 180 мг

Смотреть цену на iHerb

Специалисты компании стабилизировали экстракт вещества, чтобы получить его в максимальной концентрации. Процесс производства 100%-ного соединения запатентован и позволяет сохранить все полезные свойства продукта. В 1 порции препарата содержится 180 мг чистого экстракта, а капсула состоит из воды и гипромеллозы.

Вегетарианское средство не содержит продуктов животного происхождения, потенциальных аллергенов.

Суточная доза – 1 капсула. Другой график приема может назначить только лечащий врач. При использовании иных медикаментов или наличии заболеваний следует предварительно проконсультироваться со специалистом.

Показания к применению

Средство показано к использованию при лечении большого количества заболеваний, а также для профилактики патологий:

  1. образование холестериновых бляшек, повышенный риск их появления;
  2. нарушения липидного обмена;
  3. избыточный вес, при котором наблюдаются проблемы с сердечно-сосудистой сферой;
  4. снижение иммунитета, частые простудные заболевания. Добавку можно использовать в качестве средства профилактики в период обострения ОРВИ и гриппа;
  5. нарушения половой функции у мужчин. БАД положительно влияет на состояние сосудов, в том числе в половых органах;
  6. повышенный риск развития заболеваний сердечно-сосудистой системы;
  7. сахарный диабет, а также его профилактика (помогает стабилизировать уровень сахара).

Влияние на уровень тестостерона

Изначально считалось, что чеснок необходим для поддержания мужского здоровья, поскольку способствует повышению уровня тестостерона. Но более поздние исследования доказали обратное. Действующее вещество, которое содержится в растении, способствует снижению уровня этого важного гормона.

Именно поэтому биодобавки, в состав которых входит аллицин, рекомендуют принимать женщинам с повышенными показателями тестостерона. Превышение гормона провоцирует бесплодие, проблемы с менструальным циклом и репродуктивной системой. Кроме того, высокий уровень тестостерона вызывает чрезмерный рост волос на теле и лице и прочие неприятные косметические дефекты.

Ученые доказали, что чеснок может повышать показатели гормона (что важно для мужчин), но только в виде сухого порошка. Это связано с тем, что свежий и высушенный продукт содержат разные действующие соединения, поэтому и оказывают разное влияние на организм человека.

Allimax, Аллицин AlliUltra в капсулах

Смотреть цену на iHerb

Еще один препарат компании содержит стабилизированный экстракт соединения, выпускающийся в соответствии с запатентованным процессом. В одной капсуле содержится 360 мг чистого вещества. Капсульная оболочка производится только из растительных компонентов, поэтому продукцию могут принимать вегетарианцы.

Производитель рекомендует принимать по 1 капсуле в день, если иной график приема не предложил лечащий врач.

Средство не предназначено для употребления маленькими детьми, поэтому его нужно держать в месте, где они не смогут до него добраться.

Как принимать?

Перед началом приема следует изучить инструкцию, которую все производители прилагают к конкретному средству. Специалисты говорят о том, что ежедневно человек без опасений может получать 400 – 600 мг действующего компонента. Этого количества достаточно для общего улучшения самочувствия, стабилизации показателей холестерина. Лучше всего разбить суточную дозу на 2 – 3 приема.

Биодобавки на основе чеснока можно принимать на регулярной основе. Это натуральные препараты, которые не наносят вреда организму при отсутствии противопоказаний. Но тем пациентам, которые используют БАД для нормализации давления или уровня холестерина, врачи рекомендуют отслеживать состояние. Если после нескольких месяцев приема ситуация не улучшается, следует провести дополнительное обследование.

Jarrow Formulas, Чеснок и Имбирь, 700 мг

Смотреть цену на iHerb

Производитель разработал БАД, в котором сочетаются полезные свойства чеснока и имбиря. В состав порции входит 500 мг чеснока и 200 мг чистого концентрата корня имбиря. Продукцию получают методом естественного высушивания. Растения не подвергаются термической обработке, благодаря чему сохраняют все полезные компоненты.

Необходимо принимать по 1 – 2 капсулы один или два раза в сутки вместе с едой. Производитель рекомендует получить предварительную врачебную консультацию женщинам в положении, в период грудного вскармливания, несовершеннолетним и лицам, страдающим от некоторых заболеваний.

Побочный эффект от приема

В большинстве случаев добавка не вызывает побочных эффектов, поскольку безопасна в использовании. Это натуральный продукт, однако в редких ситуациях может спровоцировать аллергические реакции. Это может произойти, если человек значительно превысит рекомендованную дозировку. Кроме того, высокие дозы БАД могут разжижать кровь, поэтому следует быть осторожнее с его применением.

Противопоказания

Главное противопоказание к использованию средства – это индивидуальная непереносимость действующего вещества. Оно может спровоцировать аллергическую реакцию. Кроме того, есть некоторые ограничения к его применению в следующих случаях:

  1. проблемы со свертываемостью крови. Соединение увеличивает вероятность развития кровотечений, поскольку разжижает кровь. Особенно опасно употреблять его одновременно с антикоагулянтами и прочими медикаментами аналогичного действия. Нельзя принимать биодобавку перед запланированным хирургическим вмешательством;
  2. при язве желудка и 12-перстной кишки следует быть осторожнее, особенно в стадии обострения. Чеснок может спровоцировать ухудшение состояния;
  3. в период вынашивания ребенка и лактации следует отказаться от применения препарата или заранее проконсультироваться с лечащим врачом.

Аллицин – органическое соединение, которое производители научились выделять из чеснока. Вещество оказывает мощное противовоспалительное и антибактериальное действие и помогает в лечении многих заболеваний.

Добавить комментарий

Подписывайтесь на наш канал YouTube!
Распаковки посылок, обзоры товаров iHerb, скидки и личный опыт!

Аллицин

Что такое аллицин?

Аллицин - это защитный механизм чеснока от нападений вредителей. Когда чеснок подвергается атаке или травме, он вырабатывает аллицин в результате ферментативной реакции. Фермент аллииназа превращает химический аллиин в аллицин, который токсичен для насекомых и микроорганизмов. Антимикробное действие аллицина было обнаружено в 1944 году Каваллито. Очищенный аллицин не продается в коммерческих целях, поскольку он нестабилен и имеет неприятный запах. Аллицин, извлеченный из чеснока, теряет свои полезные свойства в течение нескольких часов и превращается в другие серосодержащие соединения.Диаллил трисульфад, который похож на аллицин, но производится химически, стабилен и используется для лечения бактериальных, грибковых и паразитарных инфекций.

Распространение

Аллицин - преобладающий тиосульфинат в чесноке (Allium sativum). Аллицин - это химическое вещество, отвечающее за характерный неприятный запах чеснока.

Польза аллицина для здоровья

Аллицин, одно из соединений серы чеснока, обладает антиоксидантной активностью и показано, что он вызывает множество действий, потенциально полезных для здоровья человека.Аллицин проявляет гиполипидемический, антиагрегантный и прокциркуляторный эффект. Обладает антибактериальным, противоопухолевым и химиопрофилактическим действием. Кроме того, экстракт выдержанного чеснока обладает гепатопротекторным и нейропротекторным действием. Но фактором, ограничивающим биологическую активность аллицина, является его нестабильность. Свежие измельченные зубчики чеснока обладают антибактериальной активностью и химически определяемым аллицином, но эта активность снижается с каждым днем ​​в водных и этанольных растворах. Аллицин также не является биодоступным и не всасывается в кровь даже после приема большого количества аллицина.
Противомикробный
Антимикробный эффект аллицина обусловлен его химической реакцией с тиоловыми группами различных ферментов. Фитохимический препарат подавляет бактерии и вирусы, а также дрожжи, такие как кандида. Благодаря своей антимикробной активности аллицин может быть эффективным терапевтическим кандидатом для ускорения заживления язвы. Исследования in vitro продемонстрировали антимикробную активность в отношении различных патогенов, таких как Helicobacter pylori, Staphylococcus aureaus, Escherichia coli и стрептококки группы B Lancefield.
Противораковое средство
Исследования in vitro показывают, что аллицин подавляет инвазию и метастазирование клеток карциномы толстой кишки человека. Фитохимикат также проявляет антигенотоксическое действие. Но противоопухолевый эффект аллицина у людей остается неопределенным из-за его низкой стабильности и плохой биодоступности.
Здоровье сердца
Считается, что чеснок улучшает здоровье сердца за счет снижения кровяного давления, но научные исследования дали противоречивые результаты. Одно исследование показало, что защитная роль аллицина против атеросклероза является не только прямым результатом его антиоксидантной активности, но и других механизмов, таких как модификация липопротеинов, ингибирование поглощения ЛПНП и деградация макрофагами.

Research Reviews

Потребление чеснока и его биоактивных компонентов
Влияние нагревания на противораковые свойства чеснока.
Фармакологическая активность экстракта выдержанного чеснока по сравнению с другими препаратами из чеснока.

Синонимы

Диаллилтиосульфинат
.

Аллицин (из чеснока) Польза для здоровья, побочные эффекты

Что такое аллицин?

Аллицин - сероорганическое соединение, относящееся к индолам; в природе встречается в измельченном чесноке (Allium sativum) [1] .

Продукты с высоким содержанием аллицина

Продукты, богатые аллицином, включают чеснок, лук, лук-шалот, китайский чеснок и лук-порей [1] .

Чесночные добавки

Добавка с чесноком, содержащая аллицин или его производные [1] :

  • Свежие дольки чеснока.Создание аллицина из аллиина стимулируется измельчением сырого чеснока и предотвращается приготовлением чеснока, поскольку фермент, превращающий аллиин в аллицин, разрушается. Чтобы получить оптимальное количество аллицина, чеснок следует есть сырым или нарезать и хранить за десять минут до приготовления.
  • Порошок или сушеный чеснок
  • Чесночное масло паровой дистилляции
  • Мацерат чесночного масла

Пищевые добавки с чесноком для здоровья

Чеснок ВЕРОЯТНО ЭФФЕКТИВЕН в:

  • Высокое артериальное давление.
  • Грибковые инфекции, такие как стригущий лишай, зуд спортсмена и микоз (при нанесении на кожу)

Добавки с чесноком ВЕРОЯТНО НЕЭФФЕКТИВНЫ [1] в профилактике или лечении рака (груди, колоректального, пищевода, желудка, легких, множественной миеломы, простаты), муковисцидоза, сахарного диабета 2 типа, высокого уровня холестерина, высокого кровяного давления и желудочные инфекции, вызванные бактерией Helicobacter pylori и другими инфекциями, боль в ногах, вызванная плохим кровообращением в ногах или репеллент от комаров или тиков.
НЕДОСТАТОЧНОЕ ДОКАЗАТЕЛЬСТВО [1] об эффективности чесночных добавок в профилактике или лечении стенокардии (сердечной боли в груди), атеросклероза, доброкачественной гиперплазии предстательной железы, простуды, мозолей, фиброзно-кистозной болезни груди, гастрита, выпадения волос. сердечные заболевания, гепатит, отравление свинцом, болезненность мышц после физических упражнений, склеродермия, молочница (кандидоз полости рта) и бородавки или при улучшении спортивных результатов.

Безопасность чеснока: токсичность, побочные эффекты

Чеснок ВЕРОЯТНО БЕЗОПАСЕН при приеме внутрь в соответствующих количествах на короткий срок [3] .Токсичность и безопасность длительного использования чесночных добавок еще не оценивались, хотя [2] .

Побочные эффекты чесночных добавок могут включать неприятное дыхание и запах тела, изжогу, тошноту, рвоту, вздутие живота, диарею, повышенный риск спонтанного или послеоперационного кровотечения и аллергические реакции [1] .

Чесночные добавки ВОЗМОЖНО БЕЗОПАСНЫ при приеме детьми, а также во время беременности и грудного вскармливания. [3] .В одном исследовании запах чеснока в грудном молоке продлевал прикрепление младенцев к груди [2] .

Кому следует избегать добавок чеснока?

Людям со следующими заболеваниями может потребоваться избегать добавок чеснока [3] :

Нарушения свертываемости крови. Чеснок, особенно свежий чеснок, может увеличить риск кровотечения у людей с нарушениями свертываемости крови или у тех, кто подвергается хирургическому вмешательству.

Низкое кровяное давление : Чеснок снижает кровяное давление.Теоретически употребление чеснока может привести к слишком низкому кровяному давлению у людей с низким кровяным давлением.

Взаимодействие чеснока и лекарственных препаратов

Добавки с чесноком могут снизить эффективность лекарств, таких как изониазид, саквинавир и лекарств от ВИЧ / СПИДа (невирапин, эфавиренц), противозачаточных таблеток, циклоспорина, энфлурана, галотана, ловастатина и других [3] .

Чеснок не усиливает действие разжижителей крови [2] .

.

Какая польза для здоровья от аллицина?

AtnoYdur / iStock / Getty Images

Когда вы надкусываете свежий чеснок - разрезаете его или раздавливаете - он выделяет компонент, называемый аллицином, из компонента-предшественника аллиина. По данным Медицинского центра Университета Мэриленда, аллицин обладает антибактериальными, противогрибковыми и противовирусными свойствами. Аллицин полезен при ряде заболеваний, но никогда не пытайтесь лечить себя чесноком. УГМК рекомендует принимать травы только под наблюдением специалиста по ботанической медицине.

Компоненты свежего чеснока

Аллиин - это химическое соединение, производное от аминокислоты цистеина. Не имеет запаха, но содержит серу. Когда чеснок разрезан или раздавлен, аллиин вступает в контакт с ферментом аллиназой, который превращает аллиин в аллицин. Аллицин является основной причиной резкого запаха чеснока и, по-видимому, ответственен за многие его преимущества для здоровья, объясняет УГМК.

Рекомендации перед использованием

По данным УГМК, хотя аллицин оказывает благотворное воздействие, человеческий организм не усваивает его эффективно.Производители пищевых добавок ферментируют выдержанный чеснок, чтобы расщепить аллицин до водорастворимых и маслорастворимых серосодержащих химических соединений, которые организм может лучше усвоить. Эти компоненты выдержанного чеснока полезны для здоровья, снижая уровень холестерина и предотвращая сердечные заболевания и рак. Однако добавки с ферментированным выдержанным чесноком практически не содержат аллицина, а добавки с чесноком, не стандартизованные для аллицина, могут не содержать этого вещества. Поскольку некоторые производители добавок считают, что аллицин является основным активным ингредиентом чеснока, они используют процессы, которые стабилизируют аллиин и предотвращают его расщепление на аллицин до тех пор, пока чеснок не будет съеден.Неясно, насколько хорошо эти процессы работают, объясняет университетская больница Университета Южной Калифорнии.

Specifics

В обзоре, опубликованном в февральском выпуске журнала «Bioscience, Biotechnology and Biochemistry» за 2009 год, отмечается, что аллицин обладает множеством антимикробных свойств. Он обладает противовирусным действием, а также эффективен против широкого спектра бактерий, включая устойчивые к лекарствам штаммы стафилококка. УГМК сообщает, что местное применение чеснока может помочь в лечении грибковых заболеваний кожи, таких как опоясывающий лишай, известный как стригущий лишай.

Использование и дозировка

Добавки с чесноком с высоким содержанием аллицина продаются из-за их способности бороться с бактериальными, грибковыми и вирусными инфекциями. Типичная дозировка, как указано в UMMC, - это две лиофилизированные таблетки по 200 миллиграммов, принимаемые три раза в день, причем таблетки стандартизированы до содержания аллицина не менее 0,6 процента. Некоторые добавки стандартизированы и содержат от 10 до 12 миллиграммов / грамм аллиина и 4000 микрограммов общего аллицинового потенциала, которые могут быть указаны на этикетке как ТАР.

.

Влияние аллицина на артериальную гипертензию и сердечную функцию при хроническом заболевании почек

Эта работа была выполнена для изучения влияния аллицина на гипертензию и сердечную функцию на модели ХБП у крыс. Группы были контрольными, с ХБП (нефрэктомия 5/6) и с ХБП-аллицином (ЦКДА) (40 мг / кг в день / перорально). Контролировали артериальное давление (еженедельно / 6 недель). Определялись сердечная функция, ответ сосудов на ангиотензин II, оксидативный стресс и морфометрические параметры сердца. В группе ХБП наблюдалась гипертензия и протеинурия.Коронарная перфузия и давление в левом желудочке были снижены в группе с ХБП. Напротив, сосудистый ответ на ангиотензин II и экспрессия рецептора ангиотензина II типа 1 (AT1R) были увеличены. Эти данные были связаны с увеличением морфометрических параметров (масса сердца и левого желудочка, сердце / BW и индекс массы левого желудочка, а также толщина стенки). Одновременно окислительный стресс усиливался и обратно коррелировал с экспрессией Nrf2, Keap1 и антиоксидантных ферментов, регулируемых Nrf2.Лечение аллицином уменьшило гипертензию и улучшило функции почек и сердца; кроме того, он снижает реактивность сосудов к ангиотензину II, избыточную экспрессию AT1R и сохраняет морфометрические параметры. Аллицин также подавлял Keap1 и увеличивал экспрессию Nrf2, повышал активность антиоксидантных ферментов и снижал окислительный стресс. В заключение, аллицин показал антигипертензивный, нефропротекторный, кардиозащитный и антиоксидантный эффекты, вероятно, за счет подавления экспрессии AT1R и Keap1.

1. Введение

Хроническая болезнь почек (ХБП) считается одним из наиболее серьезных заболеваний, которые ложатся тяжелым бременем на системы здравоохранения. По мере прогрессирования ХБП часто приводит к серьезным сердечно-сосудистым (ССЗ) событиям. Пациенты с ХБП чаще умирают от сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), чем прогрессируют до почечной недостаточности [1, 2]. Фактически, риск смерти от сердечно-сосудистых заболеваний у этих пациентов в 10-20 раз выше, чем у контрольных субъектов того же возраста и пола без ХБП [3, 4]. Между ХБП и ССЗ существует тесная взаимосвязь, которую можно объяснить типичным объединением нескольких факторов риска при ХБП, таких как гипертония, оксидантный стресс, протеинурия, перегрузка объемом, активация ренин-ангиотензиновой системы и другие аутокринные и паракринные механизмы. [5].Эти факторы могут активироваться независимо от гемодинамической перегрузки. Со временем наблюдаются нарушения как структуры, так и функции, которые возникают даже на самых ранних стадиях ХБП без явных ССЗ [6]. Основной ответ кардиомиоцитов и стенки левого желудочка на внутренний и биохимический стресс при ХБП - это гипертрофия, которая на первых этапах может успешно компенсировать, но неизбежно прогрессирует до дилатации и сердечной недостаточности.

Несмотря на разнообразие препаратов для лечения ХБП, сердечно-сосудистые осложнения продолжают оставаться основной причиной смерти пациентов с ХБП.Многие исследования документально подтвердили положительное влияние функциональной пищи и нутриентов на сердечно-сосудистые заболевания [7].

Хотя в нескольких отчетах было высказано предположение, что свежий экстракт чеснока обладает защитным действием против сердечно-сосудистых заболеваний, включая инсульт, ишемическую болезнь сердца и гипертонию, точный механизм, ответственный за эти эффекты, еще предстоит определить [8–11]. Снижающие кровяное давление свойства чеснока, по-видимому, исходят от луковицы растения и связаны с серосодержащими соединениями.Среди них аллицин (аллил-2-пропентиосульфинат или диаллилтиосульфинат) считается одним из основных биоактивных сероорганических соединений, синтезируемых в чесноке. Аллицин естественным образом вырабатывается из стабильного предшественника S-аллилцистеин-S-оксида (аллиина) под действием фермента аллииназы, когда зубчики чеснока измельчаются или мацерируются [12].

Недавние исследования показали, что лечение аллицином снижает системное артериальное давление у крыс со спонтанной гипертензией и защищает от коронарной эндотелиальной дисфункции и гипертрофии правых отделов сердца у крыс с гипертензией [12, 13].Несмотря на исследования, подтверждающие вазопротекторный эффект чеснока, роль аллицина на сердечную функцию при ХБП все еще остается неизвестной. Таким образом, настоящее исследование было направлено на изучение влияния аллицина на артериальную гипертензию и сердечную функцию на экспериментальной модели ХБП.

2. Материалы и методы
2.1. Реагенты

Ангиотензин II (Ang II), дихлорметан, диаллилдисульфид, пероксид водорода, 4-нитрофенол, тетраметоксипропан, динитрофенилгидразин, метансульфоновая кислота и 1-метил-2-фенилиндол были приобретены у Sigma-Aldrich (St.Луис, Миссури, США). Все остальные использованные химические вещества были самой высокой степени чистоты.

2.2. План эксперимента

Использовали крыс-самцов линии Вистар массой тела 280–300 г. Крыс случайным образом разделили на три группы: контрольная или фиктивная (C), хроническая болезнь почек (CKD) [индуцированная субтотальной аблацией почек (5 / 6Nx)] и хроническая болезнь почек, обработанная аллицином (CKDA) (40 мг / кг. / сутки, по). Все экспериментальные группы содержались при лабораторной диете, воде ad libitum , 12-часовом цикле свет / темнота, температуре 21 ° C и относительной влажности 70% в течение шести недель.

2.3. Заявление об этике

Это исследование было проведено в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных, опубликованным Национальным институтом здравоохранения США и одобренным Исследовательским комитетом Национального института кардиологии I. Ch. и Федеральным регламентом Мексики по экспериментам и уходу за животными (NOM-062-ZOO-2001) и по утилизации биологических остатков (NOM-087-ECOL-1995).

2.4. Аллицин

Аллицин получали окислением диаллилдисульфида, как сообщалось ранее [14].Вкратце, 1 г диаллилдисульфида растворяли в 5 мл уксусной кислоты при перемешивании на ледяной бане. Постепенно добавляли перекись водорода (1,5 мл, 30% об. / Об.) И реакции давали возможность протекать в течение 30 мин. После этого реакцию выдерживали при 13 ° C в течение 20 мин; затем его снова помещали в ледяную баню на 5 часов, останавливали добавлением 15 мл дистиллированной воды при pH 6,5 и экстрагировали 30 мл дихлорметана. После 5 экстракций 5% (мас. / Об.) Na 2 CO 3 (по 20 мл каждая) и 3 экстракций дистиллированной водой (по 20 мл каждая) растворитель оставляли для испарения до тех пор, пока не останется желтоватое масло (аллицин).Для стабилизации и хранения аллицин ресуспендировали в воде при 2,5% (мас. / Об.) И хранили при -70 ° C до использования.

2.5. Индукция экспериментальной модели хронического заболевания почек

Под анестезией изофлуораном выполнялась субтотальная аблация почки путем удаления правой почки и селективного инфаркта примерно двух третей левой почки путем перевязки двух или трех ветвей почечной артерии ( 5 / 6Nx). Имитационная операция состояла из вентральной лапаротомии и манипуляции почками и почечной ножкой без разрушения почечной ткани.Мышечные и кожные разрезы зашиты полипропиленовой нитью. Животные были возвращены в зоопарк для восстановления после операции [15].

2.6. Запись систолического артериального давления (САД)

После 5 / 6Nx систолическое артериальное давление (САД) контролировалось еженедельно в течение шести недель с помощью утвержденного метода плетизмографии с манжетой на хвосте с использованием крыс в сознании (XBP-1000 Kent Scientific, CT, США).

2.7. Функция почек

Через шесть недель наблюдения крыс помещали в метаболические клетки (Nalgene, Rochester, NY, USA) для сбора суточной мочи.Образцы мочи центрифугировали при 5000 × g в течение 15 минут для удаления дебриса и анализировали супернатант. Измеряемыми параметрами мочи были диурез, креатинин, мочевина (IL 300 plus, Clinical Chemistry Analyzer, Instrumentation Laboratory, Бедфорд, Массачусетс, США) и протеинурия.

2.8. Оценка сердечной функции

Крыс подвергали внутрибрюшинной анестезии пентобарбиталом натрия (60 мг / кг), и полное отсутствие болевой реакции оценивали путем определения рефлекса отдергивания педали.Затем вводили гепарин натрия (1000 Ед / кг) и через 5 минут выполняли торакотомию по середине грудины. Грудь была открыта, и через восходящую аорту была проведена свободная лигатура. Сердце было удалено от некардиальной ткани и перфузировано ретроградным способом через нерециркулирующую перфузионную систему при постоянном потоке. Коронарный кровоток регулировали с помощью перистальтического насоса с регулируемой скоростью (Harvard Apparatus, модель 1215 Holliston, MA, США). Первоначальная скорость перфузии 15 мл / мин в течение 5 минут сопровождалась 25-минутным периодом уравновешивания при скорости перфузии 8 мл / мин.Перфузионная среда представляла собой раствор Кребса-Хенселейта следующего состава (мМ): NaCl 117,8; KCl 6; CaCl 2 1,75; MgSO 4 1,2; NaH 2 PO 4 1,2; NaHCO 3 24,2; глюкоза 5; и пируват натрия 5. Раствор уравновешивали 95% O 2 –5% CO 2 , pH 7,4, и выдерживали при 37,5 ° C. Пара стимулирующих электродов, сделанных из небольшой проволоки из нержавеющей стали (сосудистые зажимы / Fine Surgical Instruments, Калифорния, США), помещали на расстоянии 2 мм друг от друга в правую предсердно-желудочковую бороздку.Для стимуляции применялись электрические прямоугольные импульсы длительностью 2 мс и удвоением электрического порога с частотой Гц.

После периода уравновешивания для определения изменений коронарной перфузии и систолического давления были выполнены приращения коронарного кровотока (6–14 мл / мин).

Для измерения внутрижелудочкового давления в левом желудочке баллон, заполненный латексной жидкостью (400 мкл л раствора Кребса), был помещен в желудочек и подключен к датчику давления, который, в свою очередь, адаптирован к компьютеризированной системе сбора данных (BIOPAC Systems, CA, США).Измерения функции ЛЖ были получены, когда препарат достиг устойчивого состояния (≈15 мин).

Чтобы оценить коронарную реактивность в сердце, анализ доза-ответ был оценен при возрастающих дозах Ang II (10 -9 , 10 -8 , 10 -7 и 10 -6 M) для 10 минут через проточный насос, подключенный к перфузионной канюле.

2.9. Морфология и гистология сердца

В конце периода наблюдения шесть крыс из каждой экспериментальной группы анестезировали внутрибрюшинной инъекцией пентобарбитала натрия (40 мг / кг).Полиэтиленовый катетер, заполненный фосфатным буфером (0,2 М, pH 7,4) и гепарином (100 МЕ / мл), вводили в восходящую аорту. Затем сердце было остановлено в диастоле путем введения 1,0 мл хлорида кадмия (100 мМ) через аортальный катетер и ретроградно перфузировано фосфатным буфером в течение 3 минут с последующей перфузией 10% нейтральным забуференным раствором формалина в течение 15 минут. После перфузионной фиксации сердце вырезали, предсердия и правый желудочек отделяли от LV, и регистрировали вес всех частей.LV был разрезан на три поперечных среза; срез на полпути между основанием и вершиной заливали парафином, делали срезы с интервалами 4 мкм и м и окрашивали НЕ [16].

Для каждого сердца были получены четыре цифровых микрофотографии с помощью объектива с низким увеличением (5x) и с помощью программы анализа изображений (Axiovision Rel 4.8.2, Zeiss, Германия) была рассчитана толщина свободной стенки. ИММЛЖ определяли как значение веса левого желудочка (мг), деленное на общую массу тела (г).

2.10. Оценка окислительного стресса в сердце

Окисление липидов . 4-Гидроксиноненаль (4-HNE) измеряли с использованием стандартной кривой тетраметоксипропана. К гомогенатам сердца добавляли раствор 1-метил-2-фенилиндола в ацетонитриле: метаноле (3: 1) и реакцию начинали с 37% HCl или метансульфоновой кислотой плюс FeCl 3 для измерения 4-HNE, соответственно. Оптическую плотность измеряли при 586 нм после 1 ч инкубации при 45 ° C. Данные были выражены в наномолях 4-HNE на миллиграмм белка.

Окисленные белки . Определение карбонильных групп в белках измеряли с помощью реакции с 2,4-динитрофенилгидразином (DNPH). Карбонильные группы оценивали с использованием молярного коэффициента поглощения 22000 M -1 · см -1 для производных DNPH, и его концентрацию выражали в нмоль карбонильных групп / мг белка.

2.11. Экспрессия рецептора ангиотензина II типа 1 (AT1R), ядерного фактора (полученного из эритроидов 2), подобного 2 (Nrf2), и кельч-подобного ECH-ассоциированного белка 1 (Keap1) в сердце

Замороженное сердце измельчали ​​в порошок и затем смешали в ледяном буфере HEPES (10 мМ HEPES, 0.2% Triton X-100, 50 мМ NaCl, 0,5 мМ сахарозы, 0,1 мМ ЭДТА, ингибиторы протеаз и фосфатаз) и гомогенизировали в охлажденном льдом гомогенизаторе Даунса при 4 ° C. Аликвоту гомогената хранили, а оставшуюся часть использовали для получения цитозольных и ядерных экстрактов. Его вращали со скоростью 10000 об / мин в течение 10 минут, супернатант отбирали на аликвоты и хранили при -70 ° C в качестве цитозольного экстракта. Осадок суспендировали в ледяном буфере (10 мМ HEPES, 500 мМ NaCl, 10% глицерин, 0,1 мМ EDTA, 0,1 мМ EGTA, 0,1% IGEPAL и протеаза и фосфата

.

Смотрите также