Полезные свойства янтарной кислоты для человека


Янтарная кислота: полезные свойства для человека, польза и вред

Для улучшения самочувствия, придания бодрости и коррекции фигуры существует много различных добавок, медикаментов и трав. В число таких средств входит и янтарная кислота, о ее пользе и вреде для человека известно далеко не всем. Поэтому есть повод рассказать о ней подробно.

Что это такое — янтарная кислота?

По-другому, это бутандиовая или этан дикарбоновая кислота — переработанный янтарь, его безвредный продукт, наполненный множеством полезных свойств.

Это белый кристаллообразный порошок на вкус схожий с лимонной кислотой. В любом организме это вещество присутствует, вырабатываясь в митохондриях по 200 мг в сутки.

Оглавление страницы:

Этого количества достаточно для обычного человека, живущего в спокойном режиме. Но наше стрессовое время делает свои поправки, снижая защитные функции – это приносит хроническую усталость, вялость, раздражительность, и в итоге сокращение жизни.

Янтарная кислота, фото

Показано принимать добавку, как правило, в случае повышенных физических, эмоциональных и интеллектуальных нагрузок. Еще янтарная кислота будет полезна при постоянном воздействии на иммунитет плохой экологии, антибиотиков и вирусов.

Суточная потребность в элементе определяется умножением веса на 0,03 г — результат будет индивидуальной нормой для употребления в день.

Янтарная кислота не вызовет привыкания и аллергической реакции, являясь природным адаптогеном, увеличивающим сопротивляемость организма к неблагоприятным воздействиям окружающей среды.

Из натуральных продуктов она содержится, например, в репе, люцерне, сахарном тростнике и недозревших ягодах. А еще в таких продуктах, как устрицы, сыр, кефир, изделия из ржи, простокваша, пивные дрожжи и выдержанное вино.

Но существуют и факторы, при которых суточная потребность в веществе увеличится:

  • простуды — из-за дополнительной нагрузки на иммунитет;
  • интенсивные физические тренировки и умственная нагрузка;
  • состояние похмелья;
  • аллергические проявления;
  • проблемы с работой сердца в виде сердечной недостаточности;
  • кожные недуги — дерматиты, угри и воспаления;
  • повышенный уровень сахара в крови — сахарный диабет и лишний вес;
  • старческий возраст.

Бывает и так, что потребность в соединении снижается, а причина тому — определенные заболевания:

  1. Повышенное артериальное давление.
  2. Камни в мочевом пузыре.
  3. Глаукома.
  4. Индивидуальная непереносимость.
  5. Язва двенадцатиперстной кишки.
  6. Ишемия.
  7. Чрезмерная секреция желудочного сока.

Из всего вышесказанного видно, что потребность в янтарной кислоте не постоянна и напрямую зависит от человеческой деятельности и образа жизни.

Полностью же вещество усваивается организмом при полноценном питании, здоровом образе жизни и правильном режиме труда и отдыха, а также при наличии дозированных физических нагрузках.

Польза и вред янтарной кислоты для человека

янтарь

В древности было принято носить украшения из янтарной смолы в качестве оберега от злых духов и болезней. Современной медицине о свойствах янтаря известно гораздо больше, чем с успехом пользуются врачи и косметологи.

Результаты исследований выявили массу полезных свойств янтарной кислоты, что также отразилось и в многочисленных отзывах о применении этого элемента:

  • начинают быстро перемещаться и всасываться аминокислоты, витамины и минералы, укрепляя и обеспечивая нормальное функционирование всех тканей и регулируя дыхание клеток;
  • нормализуется деятельность таких органов, как надпочечники и гипоталамус;
  • восстанавливается ЦНС и ослабляется вред, наносимый стрессами;
  • улучшается концентрация внимания, повышается тонус всего организма, появляются силы, бодрость и увеличивается производительность;
  • укрепляется иммунитет, что способствует улучшению противостояния вирусам;
  • нормализуется баланс воды и солей в организме, ускоряются процессы сжигания жировой ткани, что важно для людей, стремящихся похудеть и в дальнейшем поддерживать полученные результаты;
  • разрушаются и выводятся из органов и систем опасные токсины, включая этиловый спирт;
  • янтарная кислота эффективна в борьбе с болезнетворными бактериями в кишечнике;
  • улучшается кровообращение и предотвращается рост злокачественных новообразований;
  • нормализуется работа сердечной мышцы и уровня холестерина.

Янтарная кислота полезна для борьбы с лихорадочными состояниями, отечностью различного характера и воспалениями.

Выделим основные показания к применению янтарной кислоты:

1. Депрессивные состояния, неврозы, стрессы и тревоги — добавка снизит раздражительность и расслабит.

2. При работе с приборами-излучателями электромагнитные поля — нейтрализуется вредное воздействие волн.

3. Хроническая усталость, перенапряжение, как эмоциональное, так и физическое – поднимет жизненный тонус и придаст энергии.

4. Если диагностирована повышенная свертываемость крови — профилактирует риск развития тромбов.

5. Проблемы с ЖКТ — нормализует микрофлору.

6. Недуги дыхательных органов (бронхит и астма) — удалит слизь и снимет отечность.

7. При болезнях вен янтарная кислота служит вспомогательным средством, нормализуя кровоток и укрепляя стенки сосудов.

8. Если вы запланировали в ближайшем будущем беременность, то вещество простимулирует репродуктивную функцию.

9. При напряженной умственной работе ускорит мыслительные процессы и реакцию с сообразительностью.

10. Снизит вероятность появления побочных эффектов при приеме антибиотиков.

11.  Кислота необходима при усиленной кардионагрузке, ускоряя обменные процессы и заряжая энергией.

12. При частом появлении отеков и воспалений борется с болезнетворными
микроорганизмами, выводит ненужную жидкость и избавляет от лихорадки.

13. Если вы сидите на жесткой диете, элемент восстановит водно-солевой баланс в организме, ускорит процессы сжигания жира и компенсирует недостаток минералов.

14. При малой физической активности устранит симптомы кислородного дефицита, которые проявляется повышенной утомляемостью, шумом в ушах и головной болью.

15. Болезни эндокринной системы — понизит уровень глюкозы и нормализует работу щитовидки.

16. При токсикозе во время беременности предотвратит обезвоживание и компенсирует нехватку антиоксидантов, улучшая всасывание питательных веществ.

17.  В сезон гриппа и ОРВИ мобилизует защитные силы.

18. При чрезмерном употреблении алкоголя нормализует давление, выводит отравляющие вещества, улучшает общее самочувствие и поддерживает водно-солевой баланс. Для этого достаточно выпивать по 1 таблетке каждый час на протяжении 5 часов подряд.

19. При гинекологических недугах снимает воспаление и улучшает восстановление тканей.

20. Для сердца добавка полезна чтобы лучше снабжать коронарные сосуды.

21. При диагностированной онкологии употреблять от 5 до 20 таблеток в день, в
зависимости от тяжести недуга.

В косметологии янтарная кислота применяется для омоложения кожи, активизации обмена веществ и восстановления структуры волос.

Вот такой обширный спектр полезного действия у этого элемента, при этом он не вызывает никакого дискомфорта.

Применение янтарной кислоты

Выпускается вещество в 4-х видах — таблетированном, в капсулах, в форме порошка и раствора для инъекций. В качестве пищевой добавки полезные свойства янтарной кислоты используются обычно в таблетках и в капсулах.

  • В целях профилактики рекомендуется пить 2-3 таблетки дозировкой по 0,25 г каждый день на протяжении месяца.

Добавка уникальна тем, что его дозу можно подбирать самостоятельно, исходя из самочувствия, и разбавлять ее допустимо с любым соком и другим напитком.

Похудение

Ни одна пищевая добавка не способна самостоятельно удалить лишние жировые накопления в теле без приложения дополнительных усилий в виде физической нагрузки и правильного питания.

Это правило относится и к янтарной кислоте — ее применение при похудении обосновано способностью выводить токсины и улучшать обмен веществ.Еще элемент повышает общий тонус, что ускоряет процессы избавления от лишнего веса благодаря увеличению активности.

Рекомендуемая доза приема в этом случае — по 4 таблетки трижды в день перед едой за 30 минут на протяжении 2-х недель. Затем делается недельный перерыв и при необходимости курс повторяется.

Косметология

Положительное воздействие янтарной кислоты для кожи лица распространяется на:

  1. Нормализацию цвета.
  2. Питание клеток эпидермиса и устранение признаков старения.
  3. Повышение эластичности.
  4. Восстановление водно-солевого баланса.
  5. Ускорение клеточного восстановления и обменных процессов в дерме.
  6. Осветление пигментации.
  7. Улучшение кровообращения и насыщение кислородом.
  8. Избавление от прыщей и угрей.
  9. Регуляцию работы сальных желез.
  10. Разглаживание контуров шрамов и “гусиных лапок”.

Чтобы всего этого добиться, необходимо регулярно делать маски на основе янтарной кислоты. И тогда молодая, сияющая и здоровая кожа будет всегда вас радовать.

В каких случаях янтарная кислота противопоказана?

Этот уникальный природный компонент наделен множеством полезных свойств для организма, но все же принимать его рекомендуется не всем:

  • Людям, страдающим язвой желудка из-за усиления во время приема бада отделения желудочного сока, что только усугубит ситуацию;
  • При диагностированной мочекаменной болезни — добавка ускоряет обмен веществ, вызывая прогрессирование образования камней;
  • Повышенное артериальное давление, так как кислота улучшает кровообращение, тем самым оно еще больше увеличивается;
  • Стенокардия — прием добавки может спровоцировать блокаду сердца, инфаркт и аритмию;
  • Поздний гестоз в тяжелой форме и глаукома;
  • Нарушенная почечная деятельность;
  • Встречается и индивидуальная непереносимость компонентов препарата, что способно привести к сильной аллергической реакции.

Не рекомендуется пить янтарную кислоту перед сном из-за тонизирующего эффекта, который вызовет бессонницу и повышенную возбудимость ЦНС.

Добавка не является лекарством и все же не помешает перед началом ее употребления проконсультироваться со специалистом, так как неправильный прием и передозировка способны серьезно навредить организму. Следите за своим здоровьем и внешностью, но без фанатизма, и наслаждайтесь жизнью.


Метки: польза и вред препараты

янтарная кислота, 110-15-6

люцерна
Search Trop Picture
яблоневый завод
Search Trop Picture
абрикос
Search Trop Picture
побеги спаржи
Search Trop Picture
банановые фрукты
Search Trop Picture
банановый лист
Search Trop Picture
базилик
Search Trop Picture
фасоль черная фасоль фрукты
Search Trop Picture
фасоль плодовая
Search Trop Picture
пиво
Поиск PMC Изображение
лист черники
Search Trop Picture
брокколи спаржа брокколи
Search Trop Picture
лист брюссельской капусты
Search Trop Picture
облепиха плоды облепихи
Search Trop Picture
капустный лист
Search Trop Picture
корень моркови
Search Trop Picture
корень сельдерея
Search Trop Picture
сыр швейцарский сыр @ 4.00 & plusmn; 1 ммоль
Данные GC Искать изображение
вишня кислая вишня
Search Trop Picture
зеленый лук
Search Trop Picture
корень кокоса
Search Trop Picture
семена кокоса
Search Trop Picture
кукуруза
Search Trop Picture
семена кукурузы
Search Trop Picture
смородина красная смородина плоды
Search Trop Picture
инжир
Search Trop Изображение
инжир фруктовый сок
Search Trop Picture
чеснок
Search Trop Picture
лист гинкго билоба
Search Trop Picture
пыльца гинкго билоба
Search Trop Picture
виноград
Search Trop Picture
растение киви
Search Trop Picture
мелисса
Search Trop Picture
лайм
Search Trop Picture
мушмула
Search Trop Picture
люпин белый люпин семена
Search Trop Picture
манго
Search Trop Picture
луковица
Search Trop Picture
луковый лист
Search Trop Picture
апельсин
Search Trop Изображение
апельсиновый сок
Search Trop Picture
петрушка
Search Trop Picture
корень петрушки
Search Trop Picture
семена гороха
Search Trop Picture
фисташковый орех
Search Trop Picture
сливы
Search Trop Picture
гранат
Search Trop Picture
мак опийный мак латекс
Search Trop Picture
картофель
Поиск Троп Изображение
малина красная малина
Search Trop Picture
малина красная малина плоды, лист
Search Trop Picture
малина красный лист малины
Search Trop Picture
ревень
Search Trop Picture
корень сои
Search Trop Picture
семена сои
Search Trop Picture
ростки сои
Search Trop Picture
карамболы
Search Trop Picture
лист подсолнечника
Search Trop Picture
тамаринд
Search Trop Picture
семена тамаринда
Search Trop Picture
Tomatillo Fruit
Search Trop Изображение
помидор фрукты
Search Trop Picture
.

Кислоты

Ежедневно мы сталкиваемся с многочисленными амальгамами, которые химики относят к кислотным или терпким. Есть несколько видов кислот, в том числе лимонная кислота, содержащаяся в апельсиновом и виноградном соках. Апельсиновый, виноградный и другие фруктовые соки также содержат аскорбиновую кислоту, более известную как витамин С. Опять же, уксус - это еще одна кислота, уксусная кислота, которую добавляют в зеленые салаты для вкуса. Борная кислота - еще один пирог, который используется для очищения глаз.

Мазь для ногтей

Лучшее, 100% натуральное средство для ежедневного ухода за ногтями в идеальной форме.

Опять же, все химические лаборатории обладают разными типами кислот, такими как азотная, соляная и серная кислоты. Эти пироги отличаются от кислот, используемых в домашних условиях, и получены из амальгам, известных как минералы. Это более сильные кислоты, и если с ними обращаться и не осторожно, они могут привести к серьезным физическим повреждениям, например, к тлеющей шкуре или сожжению одежды.

Все кислоты кислые по вкусу. Например, лимонная кислота, присутствующая в лимонах, лаймах, винограде и апельсинах, отвечает за терпкий вкус этих фруктов.Точно так же уксус кислый из-за присутствия уксусной кислоты.

Мазь от грибка

Вся сила фармацевтических фунгицидов - но без агрессивных химикатов.

Как мы проверяем кислоты или узнаем, является ли вещество кислотным или нет? Как известно большинству, кислоты проверяются индикаторной бумагой, известной как лакмусовая бумага. Лакмус - это краситель, получаемый из окрашивающих химикатов овощей, и они бывают двух цветов - красного и синего в зависимости от терпкости вещества.В то время как красная лакмус обрабатывается кислотами и, следовательно, не меняет цвет при наливании на него кислоты, синяя лакмусовая бумажка получается из щелочных веществ, и, следовательно, при попадании на нее кислоты бумага меняет цвет и становится красной.

Если говорить об образовании кислот, то эти леденцы содержат слитый водород. Например, когда в пробирку, содержащую кислоту, такую ​​как соляная кислота, падает очень агрессивный металл, такой как цинк, возникает эффект. Шипение внутри трубки означает, что газообразное вещество вышло наружу.А если вы хотите проверить газ, образовавшийся в результате реакции между цинком и соляной кислотой, просто вставьте горящую шину в пробирку, и вы будете удивлены, заметив разрыв газа в пламя, производящее хлопок. Это доказывает, что в результате реакции между цинком и соляной кислотой образовался водород, поскольку этот газ горит с хлопком в присутствии кислорода. И второе, что нужно помнить, это то, что когда определенные кислоты противостоят металлам, в результате реакции образуется водород.

Мазь от прыщей

Акне мешает? Попробуйте эту 100% натуральную мазь и навсегда измените свою жизнь.

Также важно помнить, что кислоты производят водород в водных растворах и что кислоты всегда растворяются в воде, образуя ионизацию кислоты. На первый взгляд, когда кислоты вступают в реакцию с водой, они обычно разбавляются, но более пристальный взгляд на вопрос показывает, что в результате реакции образуются ионы водорода, а также ионы неметаллических или неметаллических многоатомных ионов.Следовательно, следуя этому правилу, когда вы разжижаете соляную кислоту в воде, она ионизируется, образуя ионы водорода и хлора.

Слабые кислоты составляют большую часть всех растительных веществ, но сравнительно очень мало их существует в свободной форме, и, следовательно, большинство растений не имеют кислого или горького вкуса. Напротив, обычно кислоты, присутствующие в растениях, в основном находятся в виде их солей, сложных эфиров или амидов и даже в форме жира или липидов, которые являются активно растворимыми. Хотя большинство химиков, которые больше заинтересованы в извлечении сильнодействующих химикатов из растений, по-прежнему игнорируют кислотные формы, присутствующие в растениях, как и многие другие типы компонентов растений, их действие часто оказывается существенным на фоне полного рецепта на травы и значительный аспект в собственности потребления фруктов и овощей.

Кислоты, полученные из растений, обычно представляют собой карбоновые кислоты, имеющие общую формулу RCOOH. Есть четыре основных категории кислот, которые извлекаются из растений, и они следующие:

  • Ароматические кислоты: исходя из своего названия, ароматические кислоты представляют собой циклические кислоты, обычно основанные на коричной и бензойной кислотах, и придают определенный аромат. Эти пироги и их побочные продукты разбросаны по природе, особенно в смолах и бальзамах. Побочные продукты или ответвления бензойной кислоты включают фенолы и салициловую кислоту, а также дубильные вещества.Опять же, одним из побочных продуктов или производных коричной кислоты является умбеллиферон, принадлежащий родственникам петрушки.
  • Многоосновные кислоты: как следует из названия поли, эти кислоты содержат более одной карбоксильной группы и обычно встречаются в растительных веществах и включают фумаровую, щавелевую и янтарную кислоты. Многоосновные кислоты обычно обладают легким слабительным действием наряду со своими собственными специфическими эффектами.
  • Одноосновные (одноосновные) кислоты: эти кислоты с прямой цепью содержат до двадцати шести атомов углерода на каждую молекулу.Эти пироги состоят из муравьиной и уксусной кислот, а также насыщенных и ненасыщенных жирных кислот, а также валериановой кислоты, получаемой из популярных трав, таких как хмель (Humulus lupulus) и валериана (Valeriana officinalis).
  • Гидроксикислоты: из названия этих кислот ясно, что они содержат как пару карбоксильных групп, так и одну гидроксильную группу, что придает им свойства кислот и спиртов. Следовательно, эти кислоты могут давать полиэфиры. Однако наиболее важным фармакологическим свойством гидроксильных кислот является их способность задерживать и эффективно противодействовать катионам, таким как ионы меди, кальция, железа и марганца.Гидроксикислоты включают следующие кислоты: лимонную, яблочную и винную.

Использование кислот

Среди остальных химических веществ серная кислота - это соединение, которое чаще всего используется в промышленных целях. Кислота используется не только отдельно, но и для приготовления других десертов, таких как соляная и азотная кислота, просто из-за ее сравнительно более высокой температуры кипения. Другие кислоты кипят при гораздо более низких температурах, что позволяет производить серную кислоту для дистилляции и сбора отдельно от исходного материала.

Серная кислота также является очень эффективным материалом для защиты от ржавчины и наносится на поверхность металлов для удаления оксидных слоев с помощью процесса, называемого травлением, до того, как на металлы будут нанесены вещества, предотвращающие их ржавление. Хромированное покрытие железа - идеальный пример этого явления. Процесс хромирования тоже прост. Перед тем, как покрыть железо хромом, его погружают в разбавленную серную кислоту, чтобы удалить оксидный защитный слой, присутствующий на его поверхности. Серные кислоты также играют жизненно важную роль в накопительных клетках.Разбавленная серная кислота действует как электролит в ячейках для хранения свинца и обеспечивает движение ионов между свинцовыми пластинами, которые выполняют роль катодов, в то время как губчатый диоксид свинца действует как аноды. Фактически, если вы внимательно посмотрите на автомобильные батареи, вы обнаружите, что многие такие свинцовые аккумуляторные элементы, соединенные вместе, составляют этот тип аккумуляторной батареи.

Среди других кислот, которые имеют огромное значение для промышленного использования, стоит отметить азотную кислоту, которая широко используется для производства удобрений, пластмасс, фотопленки и даже красителей.Помимо этих промышленных применений, азотная кислота также используется для изготовления взрывчатых веществ, таких как динамит (TNT).

Подобно серной кислоте, соляная кислота также полезна при очистке металлов. Помимо очистки металлов, соляная кислота также используется для очистки кирпича и плитки от грязи и, что удивительно, также при производстве сахар и клей. И хотя многим это может показаться невероятным, соляная кислота в небольших количествах вырабатывается в нашем желудке, чтобы помочь переваривать пищу, которую мы потребляем.

Жирные кислоты - это еще одно химическое вещество, которое в ненасыщенных условиях содержится в растениях и даже в тканях животных. Вопреки распространенному мнению, жирные кислоты чаще встречаются в растениях, чем в тканях животных. Многие могут отвергать жирные кислоты как причину ожирения, но именно эта кислота необходима для построения и восстановления клеточных структур, таких как клеточная стенка, и важных тканей центральной нервной системы. В то же время жирные кислоты необходимы для производства сырья для производства простагландинов.Здесь можно отметить, что дефицит ПНЖК (полиненасыщенных жирных кислот) в кровотоке приводит к провоцированию и хроническим заболеваниям.

В отличие от большинства других кислот, жирные кислоты встречаются в природе примерно сорока различных типов. Однако жирные кислоты можно разделить на две большие категории - насыщенные и ненасыщенные. Когда жирные кислоты не имеют двойных углерод-углеродных двойных связей, они известны как насыщенные, тогда как жирные кислоты, содержащие двойные углерод-углеродные связи, называются ненасыщенными.Среди насыщенных жирных кислот пальмитиновая и стеариновая кислоты являются наиболее распространенными, а олеиновая и линолевая кислоты являются наиболее распространенными ненасыщенными жирными кислотами. Олеиновая кислота также известна как мононенасыщенная, поскольку имеет только одну двойную связь углерод-углерод. С другой стороны, линолевая, линоленовая и арахидоновая кислоты считаются полиненасыщенными, поскольку они содержат две, три и четыре двойные связи углерод-углерод соответственно.

Ну, а как теперь измерить относительную степень ненасыщенности жира или масла? Здесь можно отметить, что самый простой способ рассчитать это - определить йодное число жира или масла.А что это за йодное число? Проще говоря, йодное число - это вес или масса йода в граммах, который сжигается или вступает в реакцию со 100 граммами жира или масла. Фактически, йод вступает в химическую реакцию с двойными связями углерод-углерод, и, следовательно, чем больше количество двойных связей, тем выше йодное число в жире или масле. Как правило, жиры имеют более низкое йодное число по сравнению с маслами, которые имеют больший процент углерод-углеродных связей, и это двойные связи.

В последнее время ПНЖК, обычно вырабатываемые организмом из арахидоновой кислоты, дигомо-у-линоленовой кислоты (GLA), основного компонента масла примулы вечерней (Oenothera biennis spp.), который используется для лечения целого ряда расстройств, вызывающих сброд. Даже воспалительные заболевания, такие как ревматоидные и экземовые состояния, а также предменструальный синдром и все подобные состояния, наиболее вероятно, были бы основаны на нехватке врожденной выработки GLA у вовлеченного человека, которые лечились с помощью ПНЖК.

Муравьиная кислота

Имея самую низкую молекулярную массу и являясь одной из самых простых карбоновых кислот, муравьиная кислота представляет собой бледную едкую жидкость с резким запахом.Он кипит при 100,7 ° C, температуре выше точки кипения воды, и затвердевает при 8,4 ° C. Муравьиная кислота имеет интересную особенность: она действует как кислота, а также как альдегид и обладает обоими качествами. Следовательно, действуя как кислота, муравьиная кислота вступает в химические реакции с большинством спиртов с образованием сложных эфиров и крошится или разлагается при нагревании. Опять же, проявляя свойства альдегида, муравьиная кислота окисляется без особых усилий.

В природе муравьиная кислота содержится в телах красных муравьев и в жалах пчел.Обычно можно получать муравьиную кислоту в небольших количествах путем окисления формальдегида, тогда как коммерческое или промышленное производство муравьиной кислоты осуществляется путем нагревания моноксида углерода и гидроксида натрия с образованием формиата натрия. Затем формиат натрия осторожно реагирует с серной кислотой, и в результате получается муравьиная кислота. Среди наиболее распространенных промышленных применений муравьиной кислоты - крашение текстиля, коагуляция латексного каучука и дубление кожи.

Муравьиная кислота также упоминается в истории болезни.В древние времена некоторые люди использовали это химическое вещество для лечения хронических воспалений суставов, вызывая местные раздражители. Разъедающие свойства вещества вызывают воспалительную реакцию при нанесении на кожу, и ранее муравьиная кислота использовалась в качестве одного из различных средств лечения противодействующих раздражителей и агентов, вызывающих образование пузырей или пузырьков. Раньше его применяли менее опасным способом, чтобы избежать повреждения перегруженного сустава. Фактически, муравьиная кислота является важным компонентом укуса крапивы европейской (Urtica spp.). Воздействие муравьиной кислоты обычно связывают с меньшей частотой артритов. Между прочим, римляне обычно рекомендовали обмолачивать пораженные суставы пучками крапивы. Однако муравьиная кислота не переносит варки и других приготовлений, так как быстро окисляется до углекислого газа и воды. Однако муравьиная кислота не играет никакой роли в целостной медицине.

Уксусная кислота

Уксусная кислота, основной элемент уксуса, представляет собой тусклую водорастворимую жидкость с резким запахом.Существует множество способов приготовления пирога. Один из многих методов - это окисление ацетальдегида, а другой - взаимодействие этилового спирта с бактериями. Его также можно получить в результате химической реакции между метиловым спиртом и оксидом углерода. В отличие от многих других веществ, уксусная кислота редко встречается в живых растениях. Среди его применений - производство ацетатных волокон и приготовление ряда сложных эфиров растворителей и пищевых ароматизаторов. Уксусная кислота придает особые свойства веществам, приготовленным из нее.Подобно уксусу, который используется в качестве консерванта, в традиционной медицине уксусная кислота использовалась для консервирования жидких лекарств из трав. Как следствие, эти лекарства можно было эффективно хранить в течение очень долгих периодов времени. Китайцы добавляли уксусную кислоту в жидкие лечебные травы, чтобы придать им особые свойства и получить из них различные формы лекарств. В наше время многие выдвигают теорию о том, что уксус можно использовать для лечения различных токсических состояний, но эта практика еще не приобрела популярность и не получила широкого распространения.

Щавелевая кислота

Щавелевая кислота, впервые обнаруженная в соке щавелевого щавеля, представляет собой бесцветную, кристаллическую, водорастворимую ядовитую кислоту, которая в основном используется в качестве лабораторного реагента, моющего средства или для отбеливания. Щавелевую кислоту можно получить разными способами. Одним из способов получения щавелевой кислоты является химическая реакция монооксида углерода с гидроксидом натрия, при этом ее также можно получить путем взаимодействия определенных углеводов с кислотами или щелочами. Эти реакции приводят к образованию нерастворимых солей вместе с такими веществами, как кальций.В то время как щавелевая кислота в этой форме особенно встречается в семействах дока и ревеня, таких как Rumex и Rheum spp. Интересно, что хотя щавелевая кислота ядовита по своей природе, она также содержится во многих распространенных продуктах, таких как чай, шпинат, свекла и петрушка, а также во многих растениях в небольших количествах. Иногда щавелевая кислота также представляет опасность для здоровья, когда чрезмерное выпадение оксалатов в кислой моче приводит к образованию мочевых камней. Таким образом, чтобы избежать камней в моче и почках, необходимо определить проблемы, с которыми сталкиваются люди, и избегать продуктов с высоким содержанием оксалатов.

Янтарная кислота

Обычно содержится в янтаре, лигните, а также во многих растениях, а также производится искусственно во время спиртовой ферментации. Янтарная кислота - это тусклая и кристаллическая двухосновная кислота. Янтарная кислота - непостоянный ингредиент во всех растительных материалах. Янтарная кислота используется в медицинских препаратах, а также в органическом синтезе. Янтарная кислота также действует как агент в процессе метаболизма в организме человека, вызывая окисление тканей. Янтарная кислота часто используется с салицилатами врачами-аллопатами для лечения артрита, а также в качестве лекарства от отравления барбитуратами.Как упоминалось ранее, янтарная кислота помогает в окислении тканей, что приводит к усилению притока крови, а это часто желательно, особенно в дегенеративной среде.

Винная кислота

Винная кислота - это бесцветный кристаллический дикарбоновый пирог, который присутствует во многих растениях и фруктах. Винная кислота образует три отдельных изомера, а именно правовращающую, лево- и мезоформу, и широко встречается во фруктах, таких как виноград и тамаринд. Хотя правые и левоформы винной кислоты оптически функциональны, мезоформа оптически неактивна, как рацемическая кислота, которая представляет собой смесь равных частей правовидной и левоформ.В отличие от щавелевой кислоты, винная кислота не может распадаться при пищеварении или метаболизме организма и, следовательно, полностью выводится с мочой. Таким образом, хотя большинство фруктовых кислот попадают в организм и приносят пользу организму в той или иной форме, винная кислота увеличивает кислотность в организме. С другой стороны, винная кислота не может всасываться организмом естественным образом, и, следовательно, она действует как мягкий осмотический или притягивающий воду сок. Винная кислота, широко встречающаяся в природе, является преимущественно правовращающей d-винной кислотой и также известна как d-2,3-дигидроксисукциновая кислота или 1-2,3-дигидроксибутандиовая кислота.Интересно, что эту разновидность винной кислоты можно несколько изменить на другие формы, нагревая ее жидкой щелочью, такой как гидроксид калия. Винные кислоты можно получить искусственно путем химической обработки малеиновой кислоты или фумаровой кислоты жидким перманганатом калия. Разнообразные изомерные разновидности винной кислоты могут иметь разные физические свойства, например температуру кипения. Основное применение винной кислоты - это различные разновидности ее солей, такие как соль Рошель и винный камень.

Лимонная кислота

Лимонная кислота - это натуральная кислота, которая содержится в большинстве кислых фруктов, включая грейпфрут, апельсины, лимоны, лаймы, крыжовник, персики, сливы и ананасы. Однако лимонную кислоту нельзя спутать с витамином С, то есть аскорбиновой кислотой. Большинство людей по незнанию или невольно смешивают эти два понятия. Интересно, что когда употребляется любое вещество, содержащее лимонную кислоту, оно превращается в бикарбонаты. По иронии судьбы эта реакция похожа на щелочную пищу, которая приводит к артриту и другим рецидивирующим заболеваниям, которые вызваны некоторыми фруктовыми кислотами.Другая ирония в употреблении продуктов, содержащих лимонную кислоту, заключается в том, что она снижает вероятность разрушения зубов. Основные свойства лимонной кислоты заключаются в том, что она способна сдерживать распространение бактерий во рту непосредственно за счет активизации слюнных выделений, что гарантирует полезную щелочь и бактерии - предотвращает покраснение слюны во рту от пищевых продуктов.

Очевидно, что, наряду с другими едкими ароматизаторами, лимонная кислота также приводит к усиленной секреции желчи из печени.Это в первую очередь связано с исходом, определяемым мотивацией едких рецепторов в полости рта, и это, возможно, объясняет, почему люди обычно используют огромное количество лимонного сока с оливковым маслом для вымывания желчных камней. Как и винная кислота, лимонная кислота также обладает свойствами мягкого осмотического сока и мочегонного средства. Таким образом, если принять во внимание влияние витамина С и биофлавоноидов, они только подчеркнут тот факт, что фрукты являются отличным пищевым продуктом с точки зрения очищения или детоксикации организма.

Бензойная кислота

Бензойная кислота - одна из простейших ароматических карбоновых кислот, которые встречаются в природе в виде кристаллического твердого вещества, имеющего точку плавления при 122 ° C и кипящую при 249 ° C. В то время как бензойная кислота, такая как бензоин камеди, может быть получена в природе из смол, пирог также можно получить искусственно путем объединения различных органических комбинаций, таких как бензиловый спирт, бензальдегид, фталевая кислота и толуол.

Как упоминалось ранее, бензойная кислота является наиболее важным ингредиентом бензоина камеди и обычно содержится в больших количествах в бальзамах Перу и Толу, а также в клюкве.При применении в меньшей дозировке или в разбавленном состоянии бензойная кислота является эффективным местным антисептиком, но более концентрированная версия кислоты действует как местное обострение. При внутреннем применении бензойная кислота имеет аналогичные эффекты. Он действует как стерилизатор кишечника и скрытый раздражитель внутри тела. Когда принимается бензойная кислота, она действует как сильное жаропонижающее средство, которое можно сравнить с салициловой кислотой или даже превзойти ее. Среди медицинских целей бензойная кислота увеличивает скорость метаболизма и использование белка организмом.

Местно бензойная кислота и бензоаты обычно используются в качестве ингаляционных средств и лекарств от горла. Препараты на основе бензойной кислоты, такие как Friar's Balsam, полезны для снятия катара верхних дыхательных путей и обладают стерилизующими, успокаивающими и едкими свойствами. В основном бензойная кислота в основном используется для получения ее солей и сложных эфиров, таких как бензоат натрия. Здесь можно отметить, что бензоат натрия обычно используется в качестве добавок в продукты питания и напитки, а также в качестве умеренных стерилизаторов во всех жидкостях для полоскания рта и зубных пастах.

Восстанавливающее средство для кожи

Усовершенствованный, 100% натуральный ревитализатор, который сделает вашу кожу сияющей и молодой.

Комментарии

.

Пробиотический потенциал штаммов Lactobacillus с антимикробной активностью в отношении некоторых патогенных штаммов человека

Целью данного исследования было выделить, идентифицировать и охарактеризовать некоторые штаммы молочнокислых бактерий из грудного молока, детских фекалий и ферментированного винограда и фиников в качестве потенциальных пробиотиков. с антимикробной активностью в отношении некоторых патогенных штаммов человека. Было выделено сто сорок бактериальных штаммов, и после первоначальной идентификации и предварительного скрининга на устойчивость к кислоте и желчи были отобраны девять лучших изолятов, которые затем идентифицировались с использованием 16 последовательностей гена S рРНК.Затем девять отобранных изолятов были охарактеризованы in vitro на предмет их пробиотических характеристик и антимикробной активности против некоторых патогенов человека. Результаты показали, что все девять изолятов принадлежали к роду Lactobacillus . Они были способны переносить pH 3 в течение 3 часов, 0,3% желчных солей в течение 4 часов и 1,9 мг / мл ферментов поджелудочной железы в течение 3 часов. Они показали хорошую способность прикрепляться к эпителиальным клеткам кишечника и не были устойчивы к тестируемым антибиотикам. Они также показали хорошую антимикробную активность против тестируемых патогенных штаммов человека, и большинство из них проявили более сильную антимикробную активность, чем контрольный штамм L.casei Широта. Таким образом, девять штаммов Lactobacillus можно рассматривать как потенциальные штаммы антимикробных пробиотиков против патогенов человека, и их следует дополнительно изучить на предмет их пользы для здоровья человека.

1. Введение

Пробиотики определяются как «живые микроорганизмы, которые при введении в адекватных количествах приносят пользу здоровью хозяина» [1]. В течение последнего десятилетия использование пробиотиков для человека привлекает все большее внимание, поскольку продолжает накапливаться научное доказательство свойств, функциональности и благоприятного воздействия пробиотических бактерий на человека.Поиск новых пробиотиков обусловлен растущим спросом на пробиотические функциональные продукты питания и напитки, а также диетические добавки из-за повышения уровня осведомленности о здоровье и растущей осведомленности потребителей о здоровье кишечника и концепции профилактического здравоохранения. В настоящее время точно установлено, что некоторые инфекции и расстройства в организме человека, такие как синдром раздраженного кишечника, воспалительные заболевания кишечника и диарея, вызванная антибиотиками, могут быть вызваны недостаточной или нарушенной микрофлорой кишечника, а пробиотики считаются неэффективными. одна из стратегий борьбы с такими нарушениями [2].Таким образом, пробиотики все чаще используются в пищевой промышленности. Молочнокислые бактерии, особенно Lactobacillus , являются наиболее часто используемыми микроорганизмами в качестве пробиотиков из-за восприятия их как желательных членов кишечной микрофлоры и из-за того, что эти бактерии имеют статус «В целом признаны безопасными» (GRAS). Растущий интерес к пробиотикам привел к тому, что многие предполагаемые пробиотические продукты поступают на рынок без проведения адекватных исследований пробиотических свойств штаммов, что приводит к проблемам с непоследовательной эффективностью продуктов.Поскольку свойства пробиотика зависят от штамма, качество продуктов тесно связано с индивидуальными штаммами в продуктах. Таким образом, они должны быть правильно идентифицированы, а их пробиотические свойства должным образом изучены. Однако в нескольких исследованиях сообщалось о неправильной идентификации или неправильной маркировке пробиотических видов или о присутствии неустановленных видов во многих коммерческих пробиотических продуктах [3–7]. В руководящих принципах, предложенных ФАО / ВОЗ [8] для оценки пробиотиков, рекомендуется правильно идентифицировать каждый потенциальный пробиотический штамм с использованием как фенотипических, так и генотипических методов с последующими различными тестами для изучения его выживаемости и функциональных свойств.Кислотность, наличие солей желчных кислот и ферментов поджелудочной железы в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) - это одни из основных стрессов, с которыми пероральный пробиотик сталкивается в ЖКТ. Важно, чтобы потенциальный пробиотический штамм был способен выдерживать эти стрессовые условия, чтобы выжить в ЖКТ. Помимо способности выжить, пробиотический штамм также должен быть способен прилипать к кишечному тракту и впоследствии колонизировать его (по крайней мере, временно). Поскольку ЖКТ представляет собой динамическую среду, поток пищеварительного тракта кишечника может вымывать любые бактерии, не прикрепленные к слизистой оболочке кишечника.Таким образом, штаммы пробиотиков, обладающие способностью к прилипанию, с большей вероятностью будут иметь повышенную возможность колонизировать ЖКТ. Передача генов устойчивости к антибиотикам от пищевых бактерий комменсальным или патогенным бактериям в кишечнике является серьезной проблемой для здоровья. Признавая важность обеспечения безопасности, в руководящих принципах ФАО / ВОЗ [8] рекомендовалось определять характер устойчивости / чувствительности к антибиотикам каждого штамма пробиотиков (включая бактерии со статусом GRAS).

Недавние опасения по поводу безудержного и неизбирательного использования антибиотиков для лечения заболеваний и стимулирования роста скота, а также развития устойчивых к антибиотикам патогенов привели к повышенному интересу к применению пробиотиков и их антимикробных метаболитов в качестве альтернативных антимикробных стратегий лечения и профилактики инфекции.Следовательно, антимикробная активность против патогенов является желательным свойством потенциального пробиотического штамма.

Настоящее исследование было проведено для выделения, идентификации и характеристики некоторых молочнокислых бактерий из грудного молока, детских фекалий, ферментированного винограда и фиников как потенциальных пробиотиков с антимикробной активностью против микроорганизмов, патогенных для человека. Свойства пробиотиков были исследованы с помощью анализов in vitro .

2. Материалы и методы
2.1. Выделение молочнокислых бактерий

Образцы грудного молока были собраны в асептических условиях у пяти здоровых женщин в течение четырех месяцев после рождения здоровых детей в Куала-Лумпуре, Малайзия. Соску и ареолу молочной железы протирали 70% этанолом и собирали около 5 мл молока в стерильную пробирку с помощью стерильного молокоотсоса. Образцы младенческих фекалий были собраны в стерильные пробирки у пяти здоровых грудных детей в возрасте от одного до четырех месяцев в Куала-Лумпуре, Малайзия.Информированное согласие было получено от доноров грудного молока и матерей младенцев. Образцы ферментированного винограда и фиников были получены из иранских ферментированных сортов винограда и фиников, которые обычно используются в качестве приправ для придания вкуса или прикорма. Виноград и финики (по 500 г) ферментировали в 100 мл воды и 20 г NaCl в бутылях емкостью 1 л в течение 40 дней при комнатной температуре. Образцы были взяты из пяти бутылок ферментированного винограда и пяти бутылок ферментированных фиников. Каждую бутылку встряхивали вручную в течение 30 с и оставляли на 5 мин при комнатной температуре, после чего собирали супернатант.

Десятикратные серийные разведения от 10 -8 до 10 -10 образцов готовили с использованием 0,5% пептонной воды (Sigma, США). Из каждого разведения 100 мкл л высевали на агаровой среде де Мана, Рогозы и Шарпа (MRS) (Merck, Германия) и инкубировали в течение 72 часов при 37 ° C в анаэробных сосудах (Oxoid, Великобритания), содержащих газовый баллон ( AnaeroGen, Oxoid, UK) (уровень кислорода <1%, уровень CO 2 от 9 до 13%). После периода инкубации колонии случайным образом отбирали из чашек и трижды субкультивировали на чашках со свежим агаром MRS.Культуры хранили в бульоне MRS, содержащем 20% (об. / Об.) Глицерина, при -80 ° C.

Сто сорок штаммов бактерий были выделены из грудного молока, детских фекалий, ферментированных фиников и ферментированного винограда. Из 140 изолятов 42 были получены из ферментированных фиников, 30 - из ферментированного винограда, 32 - из грудного молока и 36 - из детских фекалий. Окрашивание по Граму и тест на каталазу на изолятах показали, что из 140 изолятов 94 изолята были грамположительными и отрицательными по каталазе, что указывает на то, что они, вероятно, были молочнокислыми бактериями (LAB).Затем для этих изолятов был проведен быстрый предварительный скрининг на устойчивость к кислоте и желчи с использованием мутности (OD при 620 нм) в качестве измерения роста. Для устойчивости к кислоте 1% (об. / Об.) Ночной культуры (от 7 до 8 log КОЕ / мл) инокулировали в фосфатно-солевой буфер (PBS) (8 г NaCl, 0,2 г KCl, 1,44 г Na 2 HPO 4 и 0,24 г KH 2 PO 4 в 1 л дистиллированной воды) при pH 7,2 (контроль) и pH 3 (отрегулированный с помощью 1 н. HCl) (кислая среда). Затем культуру инкубировали при 37 ° C в течение 3 часов, после чего 1% (об. / Об.) Клеточной суспензии инокулировали в 10 мл бульона MRS и инкубировали при 37 ° C в течение 24 часов.Рост клеток оценивали путем измерения оптической плотности (OD) при 620 нм. Для толерантности к желчи 1% (об. / Об.) Ночной культуры (от 7 до 8 log КОЕ / мл) инокулировали в 10 мл бульона MRS с или без (контроль) 0,3% (мас. / Об.) Бычьего галла (Sigma, США). ) и инкубировали при 37 ° C в течение 4 ч, после чего рост оценивали путем измерения OD при 620 нм. В результате этого предварительного скрининга три изолята из грудного молока, три изолята из детских фекалий, один изолят из ферментированного винограда и два изолята из ферментированных фиников показали рост более 80% при pH 3 и 0.3% бычьей желчи (по сравнению с контролем) были отобраны для идентификации и анализов in vitro, пробиотических свойств. В тестах in vitro в качестве контрольного штамма использовали коммерческий пробиотический штамм Lactobacillus , L. casei Shirota из ферментированного молока Yakult. Lactobacillus casei Shirota было получено из коллекции культур фармацевтического факультета Университета технологий MARA, Малайзия.

2.2. Идентификация

Ночная культура (1.5 мл) каждого из девяти изолятов LAB в бульоне MRS центрифугировали при 5000 × g в течение 10 мин при комнатной температуре. Осадок клеток использовали для экстракции тотальной геномной ДНК с использованием набора DNeasy Blood and Tissue Kit (Qiagen, Германия). Для амплификации гена 16S рРНК использовали универсальные праймеры F27 (5'-AGAGTTTGAT CMTGGCTCAG-3 ') и R1492 (5'-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3') [9, 10] с ожидаемым размером продукта ПЦР 1,5 т.п.н. ПЦР-амплификацию проводили в 25 реакционных смесях по мкл, л, используя MyCycler Thermal Cycler (BioRad, США).Реакционная смесь для ПЦР содержала 2,5 мкл л буфера для ПЦР (буфер для 10-кратной ПЦР-амплификации, содержащий 500 мМ KCl, 100 мМ трис-HCl (pH 9,0) и 1% Triton X-100), 0,5 мкл л дезоксинуклеотидтрифосфата (dNTP, i-DNA Biotechnology, Сингапур) в концентрации 10 мМ, 0,5 мкМ л каждого праймера в концентрации 10 мкМ М, 20 мкл л деионизированной воды, 0,5 мкл л Taq ДНК полимеразы (Viogen, Тайвань, 2 ед. / мкл, л) и 0,5 мкл л матричной ДНК (что соответствует приблизительно от 50 до 100 нг ДНК).Условия ПЦР были следующими: начальная денатурация при 94 ° C в течение 4 минут, 30 циклов денатурации при 94 ° C в течение 1 минуты каждый, отжиг праймера при 55 ° C в течение 30 с и удлинение праймера при 72 ° C в течение 2 минут, и заключительный этап удлинения праймера при 72 ° C в течение 5 мин. Продукт ПЦР с ожидаемым размером 1,5 т.п.н. вырезали из геля и очищали с использованием MEGAquick-spin PCR и системы экстракции ДНК из агарозного геля (iNtRON Biotechnology, Корея). Каждый очищенный продукт ПЦР лигировали в вектор TOPO для ПЦР 2.1 с использованием набора для клонирования TOPO TA (Invitrogen, США) и клонировали в E.coli TOP 10 в соответствии с инструкциями производителя. Анализ последовательности ДНК проводили для плазмиды с уникальной вставкой с использованием автоматического секвенатора ABI 373XL (Applied Biosystems, США) в обоих направлениях для получения полной последовательности ампликонов. Наборы данных последовательностей ДНК были собраны с использованием программного обеспечения редактора выравнивания последовательностей Bioedit, версия 7.0.9.0 [11]. Значения сходства последовательностей определяли с использованием основного инструмента поиска локального сопоставления (BLAST) Национального центра биотехнологической информации (NCBI) [12].Последовательности с ≥97% сходством с ранее опубликованными последовательностями использовали в качестве критериев для определения видовой принадлежности. Выравнивание последовательностей проводили с помощью программы CLUSTAL W программы Bioedit версии 7. Филогенетическое дерево было построено на основе анализа последовательности гена 16S рРНК, в котором анализировалась 51 нуклеотидная последовательность, содержащая девять последовательностей LAB, полученных в этом исследовании, 41 последовательность принадлежала к видов Lactobacillus , которые были получены из GenBank, и последовательность Lactococcus lactis (AB100803.1), который использовался как чужая группа. Эволюционный анализ проводился с использованием молекулярно-эволюционно-генетического анализа (MEGA) версии 5. История эволюции была выведена с использованием метода объединения соседей. Бутстреппинг был выполнен для 1000 повторов, а эволюционные расстояния были рассчитаны с использованием 3-параметрического метода Тамуры [13]. Возможные аномальные последовательности гена 16S рРНК исследовались программами Mallard [14] и Bellerophon [15]. Нуклеотидные последовательности девяти изолятов LAB, определенных в этом исследовании, были депонированы в базе данных GenBank (NCBI).

2.3. In vitro Оценка характеристик выживаемости в желудочно-кишечном тракте
2.3.1. Кислотостойкость

Анализ кислотостойкости был протестирован согласно Ehrmann et al. [16] с изменениями. Клетки каждого штамма LAB (в конечной концентрации от 7 до 8 log КОЕ / мл PBS) инокулировали (1%, об. / Об.) В стерильный PBS, pH доводили до 3 с помощью 1 н. HCl (кислая среда) и PBS с нормальным pH 7,2 (контроль) и инкубировали в анаэробных условиях в течение 3 ч при 37 ° C.После инкубации получали десятикратные серийные разведения (до 10 -7 ) каждого бактериального штамма с использованием PBS. Затем 100 мкл л разведений от 10 -4 до 10 -7 из каждого образца наносили на чашки на агаре MRS и инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение 24 часов. После инкубации подсчитывали колонии на чашках и подсчитывали как КОЕ / мл. Толерантность к кислым условиям оценивалась путем сравнения количества жизнеспособных клеток после воздействия кислых (pH 3) и нормальных (контроль) условий.Анализ выполняли дважды, каждый в трех экземплярах.

2.3.2. Толерантность желчи

Тест толерантности желчи был протестирован в соответствии с Jacobsen et al. [17] с изменениями. Ночная культура каждого штамма LAB, доведенная до конечной концентрации от 7 до 8 log КОЕ / мл, была инокулирована (1%, об. / Об.) В 10 мл свежего бульона MRS с или без (контроль) 0,3% (мас. / Об. ) бычий галл и инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение 4 ч, после чего получали десятикратные серийные разведения до 10 -7 с использованием PBS.Затем 100 мкл л разведений от 10 -4 до 10 -7 из каждого образца наносили на чашки на агаре MRS и инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение 24 часов. После инкубации жизнеспособность бактериальных клеток оценивали по количеству колоний (КОЕ / мл) на чашках. Переносимость желчи оценивалась путем сравнения количества жизнеспособных клеток в MRS с желчью и без желчи (бычий галл).

2.3.3. Толерантность к ферментам поджелудочной железы

Толерантность к ферментам поджелудочной железы проверяли в соответствии с методом Rönkä et al.[18] с изменениями. Осадок собранных клеток ночной культуры каждого штамма LAB ресуспендировали в PBS до конечной концентрации от 7 до 8 log КОЕ / мл и 1% (об. / Об.) Ресуспендированных клеток инокулировали в 10 мл тестового раствора (PBS, содержащий 150 мМ NaHCO 3 и 1,9 мг / мл панкреатина (Sigma, США), pH 8) и контрольный раствор (PBS, pH 7,2). Культуры инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение 3 ч. После инкубации получали десятикратные серийные разведения до 10 -7 , используя PBS, и 100 мкл л разведений от 10 -4 до 10 -7 из каждого образца наносили на чашки на агаре MRS.Планшеты инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение 24 ч, после чего жизнеспособность бактериальных клеток оценивали по количеству колоний (КОЕ / мл). Толерантность к ферментам поджелудочной железы оценивали путем сравнения количества жизнеспособных клеток в исследуемом растворе и контрольном растворе.

2.3.4. Анализ адгезии

В анализе адгезии использовали линию клеток эпителия кишечника человека, линию клеток Сасо-2 (ATCC 2102-CRL). Клетки Caco-2 обычно выращивали до 80–85% конфлюэнтности в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM) (Sigma, США) с добавлением 20% (об. / Об.) Фетальной бычьей сыворотки (FBS) (Sigma, США), 100 МЕ. / мл пенициллина (Sigma, США) и 10 мг / мл стрептомицина (Sigma, США).Процедура, использованная для анализа приверженности, соответствовала процедуре Gopal et al. [19] с изменениями. Суспензию клеток (1 × 10 5 клеток / мл DMEM) клеток Caco-2 использовали для приготовления монослоя клеток на покровных стеклах, помещенных в шестилуночные планшеты для культур ткани. Один мл клеточной суспензии добавляли в каждую лунку планшетов, содержащих свежую DMEM, и планшеты инкубировали в течение ночи. Инкубация для поддержания клеток и анализа адгезии проводилась при 37 ° C в 5% CO 2 .Для каждого штамма LAB клетки из ночной культуры (10 мл) собирали центрифугированием при 4000 × g в течение 10 мин при 4 ° C, трижды промывали стерильным PBS (pH 7,2) и затем ресуспендировали в стерильном буфере PBS (pH 7,2). ) до конечной концентрации 8 log КОЕ / мл. Анализ адгезии выполняли путем добавления 100 мкл л бактериальной суспензии на промытый (однократно с PBS) монослой клеток Caco-2 в лунке, содержащей 2 мл свежей DMEM, и инкубировали в течение 1 ч при 37 ° C. После инкубации монослои промывали четыре раза PBS для удаления неприкрепленных бактерий, затем фиксировали 3 мл метанола и инкубировали в течение 5–10 мин при комнатной температуре.Фиксированные монослои окрашивали по Граму и исследовали с помощью светового микроскопа под масляной иммерсионной линзой (Dialux, Leitz Wetzlar, Германия). Адгезию оценивали в 20 случайных микроскопических полях и определяли количество прикрепившихся клеток LAB на клетку Caco-2. Анализ выполняли дважды, каждый в трех экземплярах.

2.4. Тест на чувствительность к антибиотикам (минимальная ингибирующая концентрация)

Тест на чувствительность к антибиотикам для штаммов LAB был проведен с использованием метода микроразведения в бульоне в соответствии со стандартом ISO 10932 / IDF 233 [20] с небольшими изменениями.Испытываемые антибиотики: ампициллин, клиндамицин, гентамицин, стрептомицин, тетрациклин, эритромицин, канамицин и хлорамфеникол (Sigma, США). Все антибиотики растворяли для приготовления исходных растворов с концентрацией 1280, мк, г / мл. Исходные растворы разводили в бульоне со средой для испытания на чувствительность (LSM) [21], чтобы получить растворы с концентрациями от 0,25 до 128 мкг / мл. Для приготовления бактериального инокулята колонии ночной культуры каждого штамма LAB суспендировали в 5 мл 0.85% раствор NaCl, доведенный до мутности 0,2 ± 0,02, и разбавленный 1: 500 в бульоне LSM. Затем по 50 мкл мкл каждого разбавленного инокулята добавляли в каждую лунку 96-луночных планшетов для микроразбавления, содержащих 50 мкл л раствора антибиотика, что приводило к концентрации примерно 5 log КОЕ / лунку для каждого бактериального посевного материала. Засеянные чашки инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение 48 часов. После инкубации значения минимальной ингибирующей концентрации (МИК) определяли как самую низкую концентрацию антибиотика, при которой подавлялся видимый рост, и сравнивали со значениями контрольной точки МИК для гетероферментативных лактобацилл, рекомендованными Группой по добавкам Европейского агентства по безопасности пищевых продуктов (EFSA). и продукты или вещества, используемые в кормах для животных [22].Точность теста была проверена путем параллельного использования штамма контроля качества ( Enterococcus faecalis ATCC 29212), как это было предложено Институтом клинических и лабораторных стандартов (CLSI) [23]. Анализ выполняли дважды, каждый в трех экземплярах.

2,5. Антимикробная активность
2.5.1. Антагонистическая активность против патогенов

Двенадцать штаммов, патогенных для человека, были использованы в качестве тестируемых патогенов для исследования антагонистической активности штаммов LAB.Это были Candida albicans (ATCC 44831), Enterococcus faecium (ATCC 51558), Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228), Propionibacterium acnes (ATCC 6919), E. coli sonnei (ATCC 25931) и Helicobacter pylori (ATCC 43579) из американской коллекции типовых культур; Enterobacter cloacae , Vibrio parahaemolyticus и Listeria monocytogenes были из коллекции культур Dr.Cheah Yoke Kqueen, отдел биомедицинских наук, факультет медицины и здравоохранения, Universiti Putra Malaysia; Klebsiella pneumoniae (K36) и Staphylococcus aureus (S244) были получены из Института медицинских исследований Малайзии.

Антагонистическая активность штаммов LAB против 12 патогенных тестируемых штаммов оценивалась с использованием теста на агаровых пятнах, описанного Touré et al. [24] с изменениями. Вкратце, 2 мкл л ночной культуры каждого штамма LAB (конечная концентрация 7 log КОЕ / мл) наносили на чашки с агаром MRS.Планшеты сушили в течение 30 мин при комнатной температуре, а затем инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение 18 ч в анаэробных сосудах (Oxoid, Великобритания), содержащих газовый баллон (AnaeroGen, Oxoid, UK). После развития колонии чашки покрывали 10 мл мягкой (0,8% (мас. / Об.) Агара) среды, специфичной для микроорганизмов, засеянной 1% (об. / Об.) Активной ночной культуры целевого патогенного штамма (конечная концентрация 7 log КОЕ / мл) и инкубировали в аэробных условиях при 37 ° C, за исключением Candida albicans , где температура инкубации составляла 24 ° C.Специфичными для микроорганизмов средами были бульон дрожжевой плесени для Candida albicans (ATCC 44831), усиленный клостридиальный бульон для Propionibacterium acnes (ATCC 6919), соевый бульон с триптиказой для Staphylococcus aureus (S244) и Enterocium. 51558), бульон сердца мозга для Listeria monocytogenes и питательный бульон для других патогенных штаммов (все среды от Sigma, США). После 48 ч инкубации измерения зон ингибирования вокруг колоний LAB проводили от внешнего края колоний до внешнего края чистых зон.Зоны ингибирования более 20 мм, от 10 до 20 мм и менее 10 мм рассматривались как сильные, промежуточные и низкие уровни ингибирования соответственно. Тест проводился дважды, каждый в трех экземплярах.

2.5.2. Характеристика антимикробных веществ

Штаммы LAB были проанализированы на продукцию противомикробных веществ, таких как бактериоцин, перекись водорода и органические кислоты, с использованием метода диффузии в лунках агара, описанного Touré et al. [24] с изменениями. Штаммы бактерий выращивали в 25 мл бульона MRS при 37 ° C в течение ночи, после чего культуры центрифугировали при 4000 × g в течение 10 мин при 4 ° C.Супернатант каждого штамма делили на равные части для разных анализов. Для анализа бактериоцина супернатант (5 мл) обрабатывали трипсином 1 мг / мл (Sigma, США) или проназой 1 мг / мл (Sigma, США). Для анализа органических кислот рН супернатанта (5 мл) доводили до pH с помощью 1 н. NaOH, а для анализа пероксида водорода супернатант (5 мл) обрабатывали каталазой 0,5 мг / мл (Sigma, США). Обработанные супернатанты стерилизовали фильтрованием через фильтры с размером пор 0,22 мкм (Pall, США), и 100 мкл мкл л помещали в лунки (диаметром 7 мм) чашек с агаром MRS, покрытые 10 мл мягкого питательного агара ( Merck, Германия) и инокулировали 1% (об. / Об.) Ночной культуры E.coli (ATCC 29181) в качестве тест-патогена (индикаторный штамм) . Планшеты выдерживали при 4 ° C в течение 3 часов для лучшей диффузии обработанного супернатанта, а затем инкубировали в течение 48 часов при 37 ° C и измеряли диаметры зон ингибирования (включая диаметр лунок 7 мм). Анализы проводили дважды, каждый в трех экземплярах.

2.5.3. Профиль продукции органических кислот

Анализы продукции органических кислот штаммами LAB проводились в соответствии с методом, описанным Erwin et al.[25] с изменениями. Ночную культуру (инкубировали при 37 ° C в анаэробной банке (Oxoid, Великобритания), содержащей газовый пакет (AnaeroGen, Oxoid, Великобритания, уровень кислорода <1%, уровень CO 2 между 9 и 13%)) каждого штамма центрифугировали при 1500 × г в течение 10 мин при комнатной температуре и 3 мл супернатанта добавляли к 600 мкл л 24% метафосфорной кислоты (в 3 NH 2 SO 4 ). Смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 24 часов, а затем центрифугировали при 1500 × g в течение 20 минут при комнатной температуре.Для определения летучих жирных кислот (уксусной, пропионовой, изомасляной, масляной, изовалериановой, валериановой и капроновой кислот) (ЛЖК) добавляли 0,5 мл супернатанта с 0,5 мл 20 мМ 4-метилвалериановой кислоты и 1 мкл л раствора. каждый образец вводили в газовый хроматограф (GC, Agilent Technologies, США) с пламенно-ионизационным детектором (FID) и капиллярной колонкой из плавленого кварца (30 м × 25 мкм м, внутренний диаметр). Температуру колонки устанавливали от 100 до 190 ° C с программированием температуры со скоростью приращения 5 ° C / мин для оптимального разделения.Температуры печи, ПИД и инжектора составляли 160, 250 и 230 ° C соответственно. В качестве газа-носителя использовали азот со скоростью потока 1.0 мл / мин. Внутренний стандарт - 20 мМ 4-метилвалериановая кислота. Уксусная кислота (20 мМ), пропионовая кислота (10 мМ), масляная кислота (10 мМ), изомасляная кислота (10 мМ), валериановая кислота (10 мМ), изовалериановая кислота (10 мМ) и 4-метилвалериановая кислота (10 мМ). ) были использованы в качестве стандартных растворов для идентификации пиков. Для определения нелетучих жирных кислот (молочной и янтарной) (без летучих жирных кислот) 0.Добавляли 5 мл супернатанта с 0,5 мл 20 мМ фумаровой кислоты и 1 мкл л каждого образца вводили в ГХ. Температуры печи, ПИД и инжектора составляли 180, 150 и 110 ° C соответственно. В качестве газа-носителя использовали азот со скоростью потока 1.0 мл / мин. Внутренний стандарт - 20 мМ фумаровая кислота. Молочная кислота (20 мМ), янтарная кислота (10 мМ) и фумаровая кислота (10 мМ) были использованы в качестве стандартных растворов для идентификации пиков. Анализы проводили дважды, каждый в трех экземплярах.

2.6. Статистический анализ

Данные каждого анализа анализировали с помощью одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с использованием программы SAS (Система статистического анализа, 2008) версии 9.2. Сравнение лечебных средств проводилось с использованием нового многодиапазонного теста Дункана. Различия считались значимыми при.

3. Результаты
3.1. Идентификация с использованием последовательностей гена 16S рРНК

Результаты сравнительного анализа гена 16S рРНК показали, что все девять изолятов LAB принадлежали к роду Lactobacillus (таблица 1).Из трех изолятов материнского молока один изолят (HM1) был на 99% подобен L. acidophilus , а два других изолята (HM2 и HM3) были на 99% подобны L. fermentum . Один изолят (FG1) из ферментированного винограда и два изолята (FD1 и FD2) из ​​ферментированных фиников были на 99% похожи на L. buchneri . Три изолята (BF1, BF2 и BF3) из детских фекалий были на 99% похожи на L. casei . Последовательности гена 16S рРНК девяти штаммов Lactobacillus были депонированы в базе данных GenBank под номерами доступа JN188382 - JN188390 для изолятов HM1, HM2, HM3, FG1, FD1, FD2, BF1, BF2 и BF3 соответственно.Чистые культуры девяти штаммов Lactobacillus были депонированы в Отделении сбора микробных культур (UNiCC) Universiti Putra Malaysia под номерами доступа UPMC 999 до UPMC 1007 для изолятов HM1, HM2, HM3, FG1, FD1, FD2, BF1, BF2 и BF3 соответственно.

99181 9026N 9026N Грудное молоко 9026N buchneri
066 JN188390 9 L.casei

Изолят Источник Инвентарный номер изолята Ближайшие подходящие виды из GenBank Сходство (%)
JN188382 Л.acidophilus 99
HM2 Грудное молоко JN188383 L. fermentum 99
HM3
FG1 Ферментированный виноград JN188385 L. buchneri 99
FD1 Ферментированные финики JN182386 99
FD2 Ферментированные финики JN188387 L.
BF3 Детские фекалии JN188389 L. casei 99
BF2 Детские фекалии 99

Значения сходства были определены с помощью основного инструмента поиска локального выравнивания (BLAST) GenBank. Последовательности с ≥97% сходством с ранее опубликованными последовательностями использовали в качестве критериев для определения видовой принадлежности.
3.2. Филогенетический анализ на основе гена 16S рРНК

На рис. 1 показано филогенетическое дерево, основанное на анализе последовательности гена 16S рРНК, отображающее филогенетические отношения между девятью штаммами Lactobacillus и 41 штаммом типа Lactobacillus , полученными из GenBank. Lactococcus lactis (AB100803.1) использовался в качестве внешней группы. Штаммы FD1 и FD2, выделенные из ферментированных фиников, и FG1, изолированные из ферментированного винограда, были сгруппированы вместе и были монофилетическими с L. buchneri M58811.1 (бутстрапное значение 78%). Три штамма, BF1, BF2 и BF3, выделенные из младенческих фекалий, были сгруппированы вместе и образовали монофилетическую кладу с L. casei AB008204.1 со значением начальной загрузки 99%. Два штамма, HM2 и HM3, выделенные из грудного молока, были монофилетическими с L.fermentum AJ575812.1 с замечательным значением начальной загрузки 100%, а другой штамм, HM1, также выделенный из грудного молока, был монофилетическим с L. acidophilus M58802.1 со значением начальной загрузки 100%.


3.3. In vitro Оценка характеристик выживаемости в желудочно-кишечном тракте
3.3.1. Толерантность к кислотам, желчи и ферментам поджелудочной железы

В таблице 2 показана жизнеспособность девяти штаммов Lactobacillus , выделенных в этом исследовании, и эталонного штамма L.casei Shirota при pH 3 и pH 7,2 (контроль). Все девять штаммов Lactobacillus показали хорошую толерантность к кислоте (pH 3), но уровень толерантности варьировал среди штаммов. Из девяти штаммов Lactobacillus восемь ( L. acidophilus HM1, L. fermentum HM2 и HM3, L. buchneri FG1, FD1 и FD2 и L. casei BF1 и BF2) показали высокий уровень кислотостойкость с потерей жизнеспособности клеток всего на 0,0–0,18 логарифмических единиц. Уровни кислотостойкости этих штаммов Lactobacillus были значительно () выше, чем у L.casei BF3 с потерей жизнеспособности клеток 0,34 log единицы и эталонный штамм L. casei Shirota с потерей жизнеспособности клеток 0,37 log единиц.

9026 902 902 902 9026 L 0,14 до н.э.

Lactobacillus штамм Жизнеспособность клеток () 1 Снижение жизнеспособности клеток (лог. Единицы)
1

Л.casei Широта * 0,37 a
L. acidophilus HM1 0,07 bc
L. fermentum HM3 0,16 до н.э.
L. buchneri FG1 0.14 до н.э.
L. buchneri FD1
.

Изменения физико-химических характеристик качества кимчи капусты в зависимости от условий хранения

В этом исследовании изучались изменения pH, содержания органических кислот, кислотности и солености кимчи, приготовленных в 0 дней, хранящихся 1-8 недель в 4 и 10 ° C и хранили при комнатной температуре в течение двух дней. Содержание органических кислот анализировали с помощью аналитической методики высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Этот метод также был проверен с использованием параметров обеспечения качества линейности, пределов обнаружения и количественной оценки (LOD и LOQ), точности и экспериментов по восстановлению пиков.При анализе содержания органических кислот (мг / кг) было обнаружено, что кимчи, хранившиеся в течение 1–8 недель при 4 и 10 ° C, показывали постепенное увеличение содержания органических кислот в течение периода хранения. Порядок органических кислот: молочная кислота> уксусная кислота> лимонная кислота> яблочная кислота> янтарная кислота> щавелевая кислота> фумаровая кислота. Значения pH кимчи, хранящейся при 4 ° C, 10 ° C и 25 ° C, составляли 4,1, 3,6–3,7 и 4,1 соответственно.

1. Введение

Кимчи - традиционный ферментированный продукт и гарнир с уникальным в Корее ароматом, который потребляется в течение длительного периода времени.Теперь его употребляют в качестве здоровой пищи в разных странах. Основные ингредиенты кимчи - капуста и редис. Однако перед ферментацией в него также добавляют различные специи, такие как порошок чили, имбирь, зеленый лук, чеснок и соленые морепродукты. Органические кислоты и свободные аминокислоты, образующиеся во время ферментации, придают кимчи уникальный вкус. Кимчи из китайской капусты (Baechu kimchi) имеет уникальный вкус, который зависит от ингредиентов, а также от созревания и распределения [1]. Раньше это было только в домах.Однако из-за изменений в рационе питания современного общества после социально-экономического развития, в настоящее время он производится компаниями в больших масштабах [2]. Сегментация рынка кимчи в связи с расширением коммерческого рынка кимчи и диверсификацией предпочтений потребителей кимчи привела к росту спроса на кимчи различной степени спелости [3].

Во время ферментации кимчи содержание органических кислот увеличивается, а сахара уменьшается. Что касается pH, он снижается при ферментации, что прямо или косвенно влияет на сенсорные характеристики кимчи [4].Предыдущие исследования характеристик ферментации кимчи показали, что на вкус кимчи значительно влияет ферментация, созревание и распределение. Ли и Чун [5] сообщили, что срок его хранения при ферментации при 4 ° C и 28 ° C составляет 30 и 3 дня соответственно. Кроме того, в другом исследовании сообщалось, что кимчи, хранящиеся при 17 ° C в течение 4 дней и хранящиеся при 4 ° C в течение 48 дней, имеют аналогичные качественные характеристики. Также исследователи сообщили об изменениях pH, кислотности и содержания органических кислот [5, 6].

Органические кислоты образуются в результате роста лактобацилл во время ферментации и созревания кимчи путем преобразования сбраживаемого сахара, содержащегося в овощах, в молочную кислоту или другие органические кислоты [2]. Таким образом, созревание и подкисление кимчи напрямую влияют на производство органических кислот, а кислый и пикантный вкус гармонизируют при оптимальном времени ферментации [7]. Существует несколько исследований изменений качества во время ферментации и факторов, влияющих на вкус и качество кимчи [8].Нелетучие органические кислоты в кимчи в зависимости от температуры созревания [9], изменения органических кислот и летучих ароматических компонентов кимчи в зависимости от типа ингредиентов [10], изменения биологических и химических свойств перезревших кимчи [11], и влияние комбинации температуры и времени ферментации на качественные характеристики кимчи из капусты [12] также были ранее исследованы.

Из-за разнообразия ингредиентов и условий брожения кимчи значительно различается; поэтому анализировать его характеристики затруднительно.Существует очень мало исследований по изменению кислотности или содержания органических кислот в зависимости от конкретных условий во время ферментации кимчи. Для созревания кимчи широко используется ферментация и хранение при низкой температуре / температуре охлаждения. Исследования, проведенные до сих пор, показывают, что общая кислотность, которая является косвенным показателем качества, сильно зависит от температуры созревания, которая, в свою очередь, значительно влияет на скорость ферментации кимчи [8, 13]. Кроме того, характер ферментации более тесно связан с температурой, чем с соленостью, поскольку участвующие бактерии меняются в зависимости от температуры ферментации, что приводит к изменению вкуса кимчи [12].Время, необходимое для достижения pH 4,2, который является pH для оптимального вкуса кимчи, составляет 10 дней при 4 ° C, 2,4 дня при 15 ° C, 1 день при 25 ° C и 19 часов при 35 ° C [8 ].

Настоящее исследование было направлено на анализ изменений качественных характеристик, таких как pH, содержание органических кислот, кислотность и соленость кимчи, хранящихся при разных температурах и времени, которые способствуют вкусу кимчи.

2. Материалы и методы
2.1. Образцы

В этом исследовании использовались образцы кимчи из капусты, выращенной в 2015 году в Тхэбэке, Корея.Все сырье, используемое для приготовления образцов, было закуплено на Западном сельскохозяйственном рынке в столичном городе Кванджу, Корея. Незначительные ингредиенты, такие как порошок чили и ферментированный соус из анчоусов, необходимые для приготовления кимчи, покупались на рынке.

2.2. Условия производства и хранения кимчи

Капуста и дополнительные второстепенные ингредиенты были предварительно обработаны в день покупки, чтобы кимчи можно было приготовить на следующий день. После удаления несъедобных частей капусту разрезали пополам.Далее куски капусты засаливали методом замачивания в соленой воде при комнатной температуре (25 ° C) в течение 12 ч в соленой воде с соленостью 10% [4]. Для равномерного посола все кочаны промокали в корзинах с водой и через 2–3 часа переставляли верхнее и нижнее положение капусты. Через 18 ч малосольные кочаны промывали 3 раза и воду сливали на 2 ч. Затем для приготовления кимчи добавляли подготовленную приправу, состоящую из редиса, зеленого лука, чеснока, имбиря, соуса из ферментированных анчоусов, порошка чили и клейкой рисовой пасты.Приготовленный образец кимчи отбирали в 0 дней, а также разделяли на партии для хранения и ферментации в течение 1–8 недель при 4, 10 и 25 ° C, которые затем ферментировали при каждой температуре. Качественные характеристики кимчи анализировали каждую неделю от 1 до 8 недель при 4 ° C и 10 ° C, и кимчи, хранящиеся при комнатной температуре, быстро созревали в течение 2 дней перед использованием в эксперименте.

2.3. Измерение pH и кислотности

Каждые 500 г кимчи, хранившиеся при каждом условии, гомогенизировали в блендере (HR1372, 700 Вт; Philips, Амстердам, Нидерланды) для измерения pH и кислотности каждого образца.Твердое содержимое фильтровали через стерилизованную марлю, и фильтрат использовали для последующих измерений. И pH, и кислотность измеряли с помощью pH-метра (TitroLine 5000; SI Analytics, Майнц, Германия). PH измеряли путем погружения pH-электрода pH-метра в жидкость кимчи. Для измерения кислотности методом Ассоциации официальных химиков-аналитиков (AOAC) [14] использовали количество 0,1 н. NaOH, необходимое для нейтрализации 10 мл жидкости кимчи до pH 8,3. Его переводили в содержание молочной кислоты (%) и записывали как титруемую кислотность.Каждый эксперимент проводился в трех экземплярах для получения среднего и стандартного отклонения.

2.4. Измерение солености

Для измерения солености 1 г каждого гомогенизированного образца кимчи добавляли в колбу на 100 мл и доводили до постоянного объема дистиллированной водой. Затем 100 мл хорошо перемешанного раствора образца фильтровали в колбе Эрленмейера на 100 мл, и фильтрат использовали для измерений. Используя метод Мора [15] для измерения солености, 1 мл 2% хромата калия добавляли к 10 мл фильтрата и 0.02 N AgNO 3 использовали для титрования. Наблюдали количество 0,02 N AgNO 3 , использованное для изменения цвета на красный.

2.5. Анализ содержания органических кислот

Каждые 500 г кимчи, хранившиеся при каждом условии, гомогенизировали в смесителе для измерения содержания органической кислоты в образцах. Затем к 2 г образца добавляли 12,5 мл дистиллированной воды. Органические кислоты экстрагировали в течение 30 минут с помощью ультразвукового устройства (Power Sonic 520; Hwashin Tech Co., Тэгу, Корея).После экстракции образец экстракта, доведенный до 25 мл, фильтровали с использованием фильтровальной бумаги. Затем этот фильтрат фильтровали с использованием шприцевого фильтра (RC, 0,2 мкм, м, 25 мм) и использовали для анализа высокоэффективной жидкостной хроматографии (1260 Infinity / G4212B; Agilent Co., Санта-Клара, Калифорния, США). Щавелевая кислота, лимонная кислота, винная кислота, яблочная кислота, янтарная кислота, молочная кислота, фумаровая кислота и уксусная кислота (Sigma, Сент-Луис, Миссури, США) были использованы в качестве стандартов для анализа органических кислот. Стандарты и образцы анализировали с помощью ВЭЖХ с использованием условий, установленных [16], которые приведены в таблице 1.Органические кислоты, обнаруженные в образцах кимчи, были идентифицированы путем сравнения времени удерживания со стандартными органическими кислотами. Затем органические кислоты в каждом образце были количественно проанализированы с использованием калибровочной кривой, полученной из площадей пиков стандартных органических кислот.


ВЭЖХ Agilent 1260 Infinity / G4212B 1260 DAD
Колонка Колонка Aminex HP × 87H (7.8 мм × 300 мм, 9 µ м, Bio-Rad, Геркулес, Калифорния, США)
Подвижная фаза 0,008 NH 2 SO 4
Детектор DAD, 210 нм
Объем впрыска 10 µ L
Скорость потока 0,6 мл / мин

2.6. Обеспечение качества

Аналитический метод определения органических кислот в кимчи был подтвержден путем оценки нескольких параметров контроля качества, таких как линейность, пределы обнаружения (LOD) и пределы количественного определения (LOQ), прецизионность и точность (процент извлечения шипов). ).Линейность по значениям коэффициента корреляции () определялась по калибровочным кривым [17, 18]. LOD и LOQ рассчитывались как тройное и десятикратное стандартное отклонение бланка, деленное на наклон аналитической кривой, соответственно [19]. Прецизионность определялась путем оценки коэффициента вариации (CV%) с использованием относительного стандартного отклонения десяти повторных определений одного образца [20]. Контроль качества анализа был подтвержден экспериментами по извлечению с добавлением выбранной концентрации в пробах.

2.7. Статистический анализ

Каждый эксперимент повторяли три или более раз и представляли как среднее значение ± стандартное отклонение. Для проверки значимости результатов использовалось программное обеспечение SPSS Version 8.2 (SPSS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина, США). Тест Дункана на несколько диапазонов был проведен в. Разницу в содержании органических кислот в кимчи в зависимости от температуры хранения оценивали с помощью линейного дискриминантного анализа (LDA). LDA - это непараметрический тест, который предполагает, что различные классы похожих объектов описываются многомерными нормальными распределениями с одинаковой ковариацией.LDA выполнялась с помощью программы XLSTAT 2015 (Addinsoft, Париж, Франция) [21].

3. Результаты и обсуждение
3.1. Валидация аналитического метода

При валидации аналитического метода ВЭЖХ значения LOD находились в диапазоне 0,806–4,447 (мг / кг), а значения LOQ - от 2,442 до 13,475 (мг / кг) (таблица 2). Извлечение (%) оказалось в диапазоне 90,12–109,81%. Все полученные значения CV% были менее 3% (0,37–1,99%). Таким образом, результаты, полученные для параметров обеспечения качества, показали, что применяемый аналитический метод полностью валидирован и соответствует критериям, требуемым AOAC.


Органическая кислота Коэффициент корреляции () LOD 1 (мг / кг) LOQ 2 (мг / кг) Извлечение 3 (%) ) CV 4 (%)

Щавелевая кислота 0,99986 4,447 13,475 97,55 0,53
Лимонная кислота 0.99978 1,136 3,442 91,60 0,54
Винная кислота 0,99985 1,759 5,329 100,99 0,37
Яблочная кислота 0,99972 1,405 107,21 1,29
Янтарная кислота 0,99955 1,321 4,003 109,81 1,26
Молочная кислота 0.99958 1,503 4,555 93,35 0,81
Фумаровая кислота 0,99915 1,309 3,967 90,12 0,72
Уксусная кислота 0,998806 0,998806 97,55 1,99

обнаружения.
Предел количественного определения.
Извлечение лимонной кислоты, яблочной кислоты, янтарной кислоты, молочной кислоты и уксусной кислоты увеличено до 1000 частей на миллион, щавелевой кислоты увеличено до 200 частей на миллион, винной кислоты увеличено до 500 частей на миллион и фумаровой кислоты увеличено до 5 частей на миллион.
Коэффициент вариации.
3.2. Изменения pH во время хранения

Во время ферментации кимчи основные компоненты, содержащиеся в китайской капусте, и второстепенные ингредиенты (соленые морепродукты, порошок чили, зеленый лук, чеснок и имбирь) разлагаются или синтезируются микроорганизмами с использованием различных ферментов. Разложение углеводов, основного компонента китайской капусты, приводит к образованию множества органических кислот, которые придают кимчи уникальный вкус [5, 22, 23].Таким образом, pH, общая кислотность и органическая кислота кимчи являются важными показателями качества для определения качества и уровня хранения кимчи. Изменения pH в кимчи в 0 дней и при хранении при 4 и 10 ° C в течение 8 недель суммированы в таблице 3. Из результатов можно заметить, что кимчи, хранившиеся при 25 ° C в течение 2 дней, имели pH 4,1 и что в 0 дней он показал pH 5,3. Однако тот, который хранился при 4 ° C, показал изменение pH в диапазоне от 5,3 до 5,8 в течение 1–3 недель, которое существенно не изменилось при раннем хранении.Однако по прошествии нескольких недель pH постепенно снизился до 4,1. PH кимчи, хранящегося при 10 ° C в течение 8 недель, быстро снизился с 5,8 в 0 дней до 4,7 за 1 неделю. Он постепенно снижался до 6 недель, пока не оставался постоянным на уровне 3,6–3,7. Значения pH кимчи, хранящиеся при 25 ° C, составляли 5,3 в 0 день и через 2 дня. В общем, изменения pH в кимчи при каждой температуре во время ферментации имеют сигмовидную кривую: медленное снижение при начальной ферментации, пока не достигнет 5,4, когда ферментация прогрессирует, быстрое снижение до 4.2–4,4 на промежуточной стадии ферментации (оптимальная стадия ферментации) и снижение до 4,0 на последней стадии ферментации [8]. Такая сигмовидная кривая наблюдается для роста живых организмов, которые в случае кимчи приписываются бактериям. В этом исследовании начальная стадия ферментации кимчи, хранящаяся при 4 ° C, наблюдалась в течение трех недель, а промежуточная стадия ферментации наблюдалась в течение трех недель, пока pH не достигал 4,1. Однако кимчи, хранящиеся при 10 ° C, демонстрируют очень короткую начальную стадию ферментации и быстрое снижение pH на промежуточной стадии ферментации.От 6 до 8 недель, когда pH составлял 3,7, наблюдалась заключительная стадия ферментации без изменений значений pH. Кимчи, произведенные летом и хранящиеся при 4 и 10 ° C, показали разные тенденции в изменении pH при хранении более 8 недель. Результаты показывают, что низкотемпературное хранение при 4 ° C позволяет снизить скорость ферментации и обеспечивает длительную ферментацию, тогда как кимчи, хранящиеся при 10 ° C, демонстрирует высокую начальную ферментацию, которая замедляется при достижении определенного уровня ферментации. Это также указывает на то, что изменения pH в большей степени связаны с температурой, а не с соленостью, подразумевая, что температура брожения в значительной степени влияет на вкус кимчи [24].


Срок хранения pH Кислотность (%)
Соленость (%)

0 дней

Срок хранения (недели) и температура (4 ° C)
1
2
.

Смотрите также