Проростки овса полезные свойства


польза и вред ростков, как употреблять проростки, лечебные свойства и противопоказания, чем полезен для человека, как принимать

Здоровым питанием сейчас увлекаются многие, в списке таких продуктов есть и ростки овса. Этот продукт обладает не просто полезными, а и лечебными свойствами. Данная статья расскажет, как правильно прорастить овёс и употреблять его.

ПоказатьСкрыть

Химический состав и калорийность

Всего 100 г продукта содержит более 53% дневной нормы пищевых волокон, а также 10 г белков, 4,7 г жиров, 57,8 г углеводов.

Полезные вещества на 100 г продукта: В состав пророщенного овса входит множество макроэлементов: Важной частью продукта является запас микроэлементов:
витамином В1 — на 33% от дневной нормы; кремний — 1000 мг; марганец — 5250 мг;
Н — на 30%; калий — 421 мг; цинк — 3610 мг;
В4 — на 22%; фосфор — 361 мг; кобальт — 8 мкг;
Е — почти на 19%; магний — 135 мг; железо — 11 мг;
В6 — 15%; хлор — 119 мг; медь — 600 мкг;
РР — 7,5%; кальций — 117 мг; молибден — 39 мкг;
В9 — почти на 7%; сера — 96 мг; селен — 23,8 мкг;
В2 — больше, чем на 5%. натрий — 75 мг. хром — 12,8 мкг;
фтор — 117 мкг;
бор — 2,7 мг;
ванадий — 200 мкг.

Заметьте, что при употреблении 100 г пророщенного овса вы обеспечите почти половину потребности организма в фосфоре, а в кремнии — превысите показатель нормы в 33 раза. Цинка в этих семенах в 300 раз больше, чем нужно нашему организму, а марганца — в 2625 раз. Также они обеспечат вам больше половины нормы кобальта, меди, железа и молибдена.

Как и многие другие растения, семя овса содержит фитиновую кислоту — химическое соединение, часть фосфора, которая отрицательно сказывается на способности макро- и микроэлементов доходить до места их действия, что было подтверждено опытами на животных. Однако эксперименты на людях этот факт не только не подкрепили, а и показали, что она не даёт развиваться тем клеткам, которые разрушают ткани костей при остеопорозе.

Было обнаружено, что постоянное попадание в организм человека фитиновой кислоты способствует привыканию к ней, в результате ценные вещества начинают усваиваться полностью. Однако до этого момента большая их часть пользы не принесёт.

Важно! Содержание в овсе фитиновой кислоты составляет 0,4–1,16% сухого вещества, но в результате проращивания это количество уменьшается, по некоторым данным, на 98%.

Чтобы активизировать процесс разрушения фитиновой кислоты при проращивании овса, к нему добавляют немного пшеницы, ржи или гречки.

Чем полезен пророщенный овёс

  • В результате употребления пророщенного овса наступит такой эффект:
  • улучшается обмен веществ;
  • увеличивается количество энергии;
  • улучшается работа нервной, пищеварительной, сердечно-сосудистой, половой систем, щитовидной железы;
  • стимулируется выведение жиров и токсинов из печени;
  • формируются эритроциты в крови;
  • обеспечивается нормальный уровень тромбоцитов;
  • регулируется жировой обмен;
  • поддерживается аппетит;
  • улучшается состояние кожи;
  • кровь обогащается кислородом;
  • стимулируется нормальная работа головного и спинного мозга;
  • поддерживается водный, кислотный, кислотно-щелочной, электролитный баланс;
  • нормализуется кровяное давление;
  • прекращается разрушение и искривление костей;
  • улучшается проводимость нервных импульсов;
  • повышается упругость кожи;
  • обеспечивается нормальное состояние соединительной ткани;
  • повышается иммунитет;
  • поддерживается нормальный уровень толерантности к глюкозе — профилактика сахарного диабета;
  • снимается усталость;
  • предупреждается развитие половой дисфункции;
  • происходит нормальное развитие плода у беременных женщин.

Как правильно проращивать

Чтобы прорастить овёс правильно, нужно:

  1. Выбрать подходящие семена.
  2. Подготовить их.
  3. Соблюдать технологию.

Знаете ли вы? Древние греки считали, что овёс им преподнесла в подарок богиня достатка и плодородия Деметра.

Выбор зерна

Хотя шелуха овсяных зёрен обладает полезными свойствами, для проращивания берут очищенные. Это связано с тем, что такая клетчатка очень грубая и не всем подходит. Купить их можно на рынке, в аптеке или магазинах, которые специализируются на продаже продуктов здорового питания.

При неправильном хранении эта культура способна заплесневеть, или её может поразить грибок. Такие зёрна в пищу употреблять нельзя.

Подготовка семян

Как подготовить злак перед тем, как оставить прорастать:

  • перебрать, вынуть потемневшие, неспелые, повреждённые, нестандартной формы, со следами грибка или гнили;
  • залить водой, выловить те, что всплыли;
  • тщательно промыть.

К семенам подбирают глиняную, стеклянную, эмалированную или фарфоровую посуду.

Варианты проращивания

Известно несколько вариантов получения ростков овса. Согласно одному варианту:

  1. Покройте влажным куском марли посуду так, чтобы её края свисали.
  2. Разложите семена на ткань, накройте свободными концами.
  3. Поместите в тёплое место подальше от солнечного света.
  4. Время от времени опрыскивайте водой из пульверизатора.
  5. Через 6–7 ч. появятся проростки, они становятся готовыми к употреблению.
  6. Промойте овёс, положите в холодильник, используйте для приготовления блюд.

Следующий вариант предлагает такую технологию:

  1. Подготовленные зёрна залейте водой (её должно быть, как минимум, вдвое больше) и оставьте на 10 ч при температуре +23…+24°С.
  2. Откиньте на сито, промойте под проточной водой, оставьте в нём на 12 ч, пока не прорастёт. Можно переложить на покрытую марлей посуду, как в первом варианте. Жидкость после проращивания семян является хорошей подкормкой для комнатных растений.
  3. Храните в холодильнике.

Важно! Овёс нельзя проращивать больше 48 ч, хранить дольше этого времени также не рекомендуется, иначе он покроется плесенью.

Способы употребления

Готовые к употреблению ростки не должны быть слишком большими, их оптимальная длина — 4–6 мм. Иначе польза превратится во вред, потому что вытянутая поросль ярко-зелёного цвета становится ядовитой. Из этого продукта готовят каши, настой, кисель, настойку.

Каша

Такую еду готовят утром. Промойте злаковые ростки, добавьте тёплую воду так, чтобы покрыла их. Через некоторое время каша готова. Её можно употреблять в чистом виде или с добавками.

Настой

Для приготовления настоя 200 г овсяных ростков залейте 2 л горячей воды или молока. Настаивайте в течение 5 ч. Принимать весь приготовленный объём в течение дня, разделив на небольшие порции курсом протяжённостью 2 месяца, чтобы улучшить работу кишечника и избавиться от усталости.

Кисель

Пригоршню пророщенных овсяных зёрен залейте 1 стаканом воды в кастрюле и поставьте на включённую плиту. После закипания убавьте огонь до минимума и держите под крышкой 3 мин. Включите плиту, дайте настояться 0,5 ч. Когда температура напитка будет подходящей для приёма внутрь, выпейте залпом. Употребляйте ежедневно в течение 1 месяца для нормализации работы поджелудочной железы и стабилизации уровня сахара в крови.

Настойка

Для приготовления настойки 1 л водки настаивают на 100 г овсяных ростков в течение 3 недель в стеклянной банке или бутылке. За это время нужно иногда встряхивать содержимое. Двукратный приём 20–30 капель ежедневно избавит вас от бессонницы, упадка сил, плохого аппетита, тяги к курению, половой дисфункции.

Знаете ли вы? В Европе и Северной Америке растёт популярность молока, приготовленного из овса.

Что можно добавлять

В качестве добавок можно использовать:

Не рекомендуется сочетание с:

Применение в народной медицине

В народной медицине пророщенный овес применяют для того, чтобы:

  • укрепить иммунитет;
  • очистить организм;
  • похудеть.

Лечебные свойства этого злака широко используются при упадке сил.

Для укрепления и повышения иммунитета

Укрепить иммунитет поможет такое средство: возьмите настойки из пророщенного овса и элеутерококка по 50 мл, из пустырника и лимонника китайского — по 20 мл. Перелейте в стеклянную тару, тщательно смешайте. Принимайте по 1 чайной ложке дважды в день перед едой, запивая отваром шиповника.

Для чистки организма

С помощью ростков овса можно очистить печень и кишечник от вредных веществ. Для этого нужно перемолоть в мясорубке или с помощью блендера 1 стакан семян, залить 0,5 стакана горячей воды, довести до кипения, подержать на слабом огне 1–2 мин. После того как смесь станет тёплой, туда подмешивают по 1 чайной ложке мёда и растительного масла и капают немного лимонного сока. Такое средство едят каждый день на завтрак. Лечение длится до 5 дней.

Для похудения

Если ваша цель — похудеть, то ростки лучше употреблять в первой половине дня, отказавшись от сахара, мёда и молока, их можно заменить сухофруктами и несладким йогуртом. Можно делать на основе проростков салаты с овощами, ягодами или фруктами. Ежедневное употребление 1 столовой ложки семян натощак стимулирует ваш кишечник быстрее перерабатывать пищу. Такое похудение не только избавит вас от лишних килограммов, но и сохранит хорошее самочувствие. Чувство голода, которое является постоянным спутником тех, кто пытается сбросить вес, поможет притупить настой или кисель из ростков.

Возможный вред и противопоказания

  • Противопоказания к употреблению указаны для тех, у кого есть:
  • непереносимость глютена;
  • аллергия на продукт;
  • мочекаменная болезнь;
  • заболевания желудочно-кишечного тракта в острой стадии.

Не рекомендуется вводить такое питание детям: в возрасте 8–12 лет его суточное количество не должно быть больше 1 столовой ложки, а до 5 лет от употребления такого продукта вообще следует отказаться. Такая еда содержит слишком грубую клетчатку для нежного детского кишечника, а также может ухудшить усвоение кальция в организме.

Возможны осложнения при болезнях жёлчного пузыря, таким пациентам не следует принимать ростки без консультации с лечащим врачом.

Таким образом, если вы следите за своим здоровьем, пророщенный овёс обязательно должен присутствовать в вашем рационе. Вы можете употреблять его с лечебной целью, чтобы похудеть или просто для сохранения свежего и бодрого внешнего вида. Однако готовить и принимать его нужно в соответствии с рекомендациями.

Очистка и биохимические свойства фитохромобилинсинтазы из этиолированных проростков овса

  • Copyright © 2001 Американское общество физиологов растений

Реферат

Фитохромы растений зависят от ковалентного присоединения линейного тетрапиррольного хромофора фитохромобилина (PΦB) для фотоактивности. В planta биливердин IXα (BV) восстанавливается пластид-локализованным ферредоксин (Fd) -зависимым ферментом PΦB-синтазой с образованием 3Z-PΦB. Здесь мы описываем более 50000-кратную очистку PΦB-синтазы из этиопластов выращенного в темноте овса ( Avena sativa L.cv Garry) проростков с использованием традиционной колоночной хроматографии и препаративного электрофореза. Таким образом, PΦB-синтаза представляет собой фермент с очень низким содержанием и высокой скоростью обновления. По нашим оценкам, скорость оборота составляет> 100 с -1 , что сходно с таковой у НАД (Ф) Н-зависимой BV редуктазы млекопитающих. Синтаза овса ФВ представляет собой мономер с массой субъединицы 29 кДа. Однако две различные заряженные формы ферментов были идентифицированы с помощью естественного изоэлектрического фокусирования. Способность PΦB-синтазы снижать BV зависит от уменьшенных Fds 2Fe-2S.А К m для шпината ( Spinacea oleracea ) Fd составлял от 3 до 4 мкм. Синтаза PΦB имеет высокое сродство к своему субстрату билина с субмикромолярным K м для BV.

Как фотосинтезирующие организмы, растения постоянно отслеживают изменения в своей световой среде и реагируют на них. Таким образом, у растений развились многочисленные системы световосприятия и передачи сигналов для модуляции роста и развития в ответ на свет (Neff et al., 2000). Семейство фитохромов у высших растений, критофиты и цианобактерии являются наиболее изученными из этих фоторецепторов (Quail, 1991; Pepper, 1998; Davis et al., 1999b). Голофитохромы представляют собой гомодимеры, состоящие из белковых субъединиц массой 124 кДа с ковалентно присоединенным линейным тетрапиррольным хромофором фитохромобилином (PΦB). Молекула хромофора позволяет голопротеину существовать в двух спектрально различных светопоглощающих формах - Pr (форма, поглощающая красный свет) и Pfr (форма, поглощающая дальний красный свет), которые жизненно важны для механизма действия фитохромов.

Предыдущие эксперименты установили, что биосинтез линейных тетрапиррольных предшественников хромофора фитохрома происходит полностью в органелле пластид (Terry and Lagarias, 1991; Terry et al., 1993). Затем PΦB попадает в цитозоль, где происходит автокаталитическая сборка с возникающими апофитохромами. Путь биосинтеза фитохромного хромофора имеет много общих промежуточных звеньев с гемом и хлорофиллом (Beale, 1993). Первый совершенный шаг в синтезе PΦB (см.рис.1) представляет собой раскрытие кольца гема с образованием биливердина IXα (BV) - реакция, катализируемая ферредоксин (Fd) -зависимой гемоксигеназой. Fd-зависимые гемоксигеназы были впервые идентифицированы у красных водорослей и цианобактерий (Rhie and Beale, 1992; Rhie and Beale, 1995; Cornejo, Beale, 1997; Cornejo et al., 1998). Ген HY1 кодирует ортологичный фермент Arabidopsis, один из четырех-пяти генов гемоксигеназы у этого вида (Davis et al., 1999a; Muramoto et al., 1999).

Рис.1.

Биосинтез ФБ из гема.Линейный тетрапиррольный предшественник хромофора фитохрома растений синтезируется из гема посредством последующих реакций гемооксигеназы и PΦB-синтазы. Полученный изомер 3Z-PΦB легко изомеризуется в его 3E-форму, обе из которых являются функциональными предшественниками хромофора фитохрома.

В одноклеточной красной водоросли Cyanidium caldarium BV является субстратом по крайней мере для двух Fd-зависимых редуктаз, которые необходимы для биосинтеза предшественников фикобилипротеинового хромофора, фикоцианобилина и фикоэритробилина (Beale and Cornebjo, 1991a, 1991a).Напротив, BV непосредственно восстанавливается до 3Z-PΦB у растений с помощью Fd-зависимого фермента PΦB-синтазы, чей ген HY2 был недавно клонирован из Arabidopsis (Kohchi et al., 2001). Было показано, что 3Z-PΦB является функциональным предшественником хромофора фитохрома; однако его изомеризация до 3E-PΦB, как полагают, происходит до ковалентного присоединения к апофитохрому в цитоплазме растительных клеток (Terry et al., 1993).

Хотя демонстрация того, что ген HY2 Arabidopsis кодирует функциональную синтазу PΦB, является значительным достижением (Kohchi et al., 2001), необходимо изучить PΦB-синтазу, выделенную из растений, чтобы убедиться, что биохимические свойства рекомбинантного фермента точно отражают свойства фермента, выделенного из природных источников. В этой статье представлены первые сообщения об очистке и биохимических характеристиках синтазы PΦB из растений. Для этих исследований были выбраны проростки овса ( Avena sativa L. cv Garry) из-за наличия большого количества ткани и высокого уровня активности синтазы PΦB в изолированных препаратах пластид этого вида (Terry and Lagarias, 1991). .Поскольку более ранние исследования показали, что PΦB-синтаза представляет собой фермент, локализованный в пластиде, препараты этиопласта использовались для увеличения активности фермента в неочищенном гомогенате. Опираясь на две системы анализа, комбинированный анализ с использованием апофитохрома для обнаружения активности холофитохрома (Terry and Lagarias, 1991) и прямой анализ на основе ВЭЖХ для обнаружения изомеров PΦB (Wu et al., 1997), мы описываем> 50000 -кратная очистка и первоначальная биохимическая характеристика этого фермента с низким содержанием с использованием стандартных методик.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Очистка синтазы ФВ

Наша лаборатория ранее задокументировала, что активность PΦB-синтазы локализована в пластидных органеллах высших растений и зеленых водорослей (Terry et al., 1993, 1995). По этой причине этиопласты использовались в качестве исходного материала для очистки синтазы PΦB. Этиопласты ресуспендировали в изоосмотическом буфере и осмотически лизировали путем разбавления 10 объемами буфера без осмотического раствора. Первоначальные эксперименты с использованием буферов для лизиса TES [N-трис (гидроксиметил) -2-аминоэтансульфоновая кислота] / HEPES [4- (2-гидроксиэтил) -1-пиперазин-этансульфоновая кислота] показали, что активность PΦB-синтазы остается связанной с мембраной, с обработкой моющими средствами и промывки с высоким содержанием солей, не дающие растворимого активного белка.Замена TES / HEPES калий-фосфатным буфером солюбилизировала от 30% до 50% общей активности синтазы PΦB, обнаруженной в неочищенных интактных этиопластах (Таблица I). Фосфатный буфер, по-видимому, действует как хелатор ионов металла, поскольку исключение иона Mg 2+ и добавление EGTA в буфер для лизиса дополнительно усиливают восстановление активности солюбилизированной PΦB-синтазы.

Таблица I.

Очистка ФБ-синтазы из этиолированных проростков овса

Протокол фракционирования от 50% до 70% насыщенного сульфата аммония был разработан для оптимизации извлечения / очистки синтазы PΦB и концентрации белкового экстракта (Таблица I).Затем было исследовано использование анионообменной хроматографии с использованием картриджа HiTrapQ, с которым фермент прочно связывается при низкой ионной силе. К сожалению, восстановление активности PΦB-синтазы с помощью этой методологии было низким (т.е. примерно 30%). По-видимому, из-за необратимой адсорбции на картридже HiTrapQ и / или денатурации фермента при низкой ионной силе мы обнаружили, что повышение ионной силы до 60 мМ KCl как в буфере для нанесения, так и в буфере до уравновешивания привело к почти количественному восстановлению активности синтазы PΦB. в проточной колонке.Этот результат был неожиданным, потому что эта концентрация KCl была намного ниже той, которая была определена для элюирования активности фермента, связанной с колонкой в ​​исходных экспериментах. При таком pH и ионной силе PΦB-синтаза прочно связывалась с картриджем с красителем HiTrapBlue (Cibacron Blue) с лигандом, но не с катионообменным картриджем HiTrapSP. Воспользовавшись этими наблюдениями, образец от 50% до 70% ASP наносили на тандемную серию картриджей HiTrapQ, HiTrapSP и HiTrapBlue в буфере с pH 7,5, содержащем 60 мМ KCl.Таким образом, PΦB-синтаза могла быть восстановлена ​​связанной с картриджем HiTrapBlue, тогда как многие примеси адсорбировались на обоих ионообменных картриджах. Затем активность синтазы PΦB была элюирована из картриджа HiTrapBlue с градиентом KCl 2 м, как показано на рисунке 2. Элюированные HiTrapBlue фракции, содержащие PΦB-синтазу (THC), затем объединяли и дополнительно фракционировали керамическим гидроксиапатитом Econo-Pac CHT-II (CHT-II) и гель-фильтрационной хроматографией (GFC). Профили элюирования для этих колонок показаны на рисунке 2.Стандарты молекулярной массы белка использовали для оценки молекулярной массы PΦB-синтазы, равной 25 кДа (рис. 3).

Рис.2.

Очистка ФБ-синтазы. A, тандемная хроматография HiTrap. Фракцию гранул сульфата аммония (ASP) в 20 мМ триэтаноламин-HCl (TEA) / HCl-KOH, 60 мМ KCl (pH 7,5) загружали в тандемную установку HiTrap с тремя картриджами (HiTrapQ-HiTrapSP-HiTrapBlue), предварительно уравновешенную тот же буфер. Картриджи разобрали, и картридж HiTrapBlue элюировали отдельно градиентом KCl.В. Хроматография на керамическом гидроксиапатите. Основной пик активности PΦB-синтазы на стадии тандемной хроматографии HiTrap (THC) загружали в картридж Econo-Pac CHT-II объемом 1 мл, уравновешенный 10 мм фосфатом калия (pH 7,3), и элюировали 10-объемным линейным градиентом калия. фосфат от 10 до 400 мм. C. Гель-фильтрационная хроматография (GFC). Пик активности CHT-II хроматографировали на колонке Pharmacia Superdex 200 3.2 / 30 SMART с 25 мМ TES / KOH, 100 мМ KCl и 10% (об. / Об.) Глицерином (pH 7.3). Относительная активность синтазы PΦB обозначена серыми многоугольниками; градиенты соли - пунктирные линии.

Рис.3.

Определение молекулярной массы PΦB-синтазы. Кажущаяся молекулярная масса PΦB-синтазы была рассчитана как 25,3 кДа с использованием стандартов от Bio-Rad в системе Pharmacia SMART с колонкой Superdex 200 3,2 / 30. Журнал молекулярной массы стандартов был нанесен на график относительно K av . Данные были нанесены на график и проведена линейная регрессия с помощью программы Kaleidagraph 3.0.

Как показано в таблице I, PΦB-синтаза может быть очищена более чем в 8000 раз с общим выходом 40% с использованием комбинации выделения органелл, фракционирования сульфатом аммония, THC, CHT-II и GFC. Поскольку SDS PAGE выявил множественные белковые компоненты (фиг.4), потребовалась дополнительная очистка синтазы PΦB. Собственное изоэлектрическое фокусирование (IEF) было исследовано из-за его высокого разрешения и неденатурирующих условий, которые позволяли анализировать синтазу PΦB. Объединенные фракции синтазы PΦB из GFC были сосредоточены на геле IEF PHAST, pH 6.От 5 до 3,0 (Amersham Pharmacia Biotech, Пискатауэй, Нью-Джерси). Часть геля разрезали на 2-миллиметровые срезы и анализировали на активность синтазы PΦB с помощью связанного анализа, тогда как оставшаяся часть геля была окрашена серебром (фиг. 5). Активность PΦB-синтазы была связана с двумя белковыми полосами с pI 5,7 / 5,6 и 5,3 / 5,2, с преобладанием более высокой формы pI. Не было обнаружено активности белка, который мигрировал к концу геля с высоким pH. Оба вида с pI 5,7 / 5,6 и pI 5,3 / 5,2 вырезали из геля, разделяли с помощью SDS-PAGE и окрашивали серебром.В обеих дорожках наблюдался основной белок с молекулярной массой 29 кДа (данные не показаны).

Рис.4.

SDS-PAGE очистки PΦB-синтазы. Один микрограмм общего белка из каждой фракции очистки PΦB-синтазы наносили на 12,5% (мас. / Об.) Полиакриламидный гель, подвергали электрофорезу и окрашивали серебром. СТД, М r стандарт; Дорожка 1 - интактные пластиды; Дорожка 2, растворимая фракция; Дорожка 3: фракция сульфата аммония от 50% до 70%; Дорожка 4, тандемный элюент HiTrap; Дорожка 5, элюент из керамического гидроксиапатита; Дорожка 6, гель-фильтрационная хроматография.

Рис. 5.

IEF синтазы PΦB. Небольшую активность на стадии гель-фильтрации очистки PΦB-синтазы подвергали электрофорезу в трех повторностях на геле IEF PHAST Pharmacia pH 6,5-3,0 с использованием системы PHAST. Две полосы геля разрезали на срезы размером 2 мм, удаляли с твердой подложки и позволяли диффундировать в течение 3 ч при 4 ° C в 100 мкм бычьем сывороточном альбумине (BSA) и 100 мМ фосфате калия (pH 7,4). После диффузии срезы анализировали на активность синтазы PΦB, используя комбинированный анализ.Остаток геля окрашен серебром. ±, указывает на присутствие или отсутствие активности синтазы PΦB в каждом срезе геля, обозначенном метками слева.

Основываясь на измерениях активности белков и ферментов, мы оцениваем общую степень очистки более чем в 50 000 раз. Несмотря на смелые попытки (например, вырезание полос из геля IEF, SDS-PAGE, при расщеплении трипсином геля полосы 29 кДа, очистка пептидов с помощью ВЭЖХ и анализ микропоследовательности белков), нам до сих пор не удалось получить последовательность белка. что позволило нам клонировать ген, кодирующий синтазу PΦB.Недавнее клонирование HY2 должно облегчить клонирование гена, кодирующего синтазу PΦB из овса (Kohchi et al., 2001).

Биохимическая характеристика синтазы PΦB

Из-за отсутствия непрерывного анализа синтазы PΦB, мы полагались на анализ ВЭЖХ для изучения зависимости субстрата BV и кофактора Fd. Все кинетические измерения были выполнены с использованием препаратов синтазы ФВ, полученных из объединенных фракций GFC. Чтобы установить, что условия начальной скорости были соблюдены, аликвоты удаляли из смеси для анализа в различные моменты времени, билины выделяли твердофазной экстракцией C18 Sep-Pak, а затем анализировали с помощью ВЭЖХ с использованием условий, описанных ранее (Wu et al., 1997) и в «Материалы и методы». Эти исследования показали производство 3Z-PΦB первого порядка в течение первых получаса анализа, что позволило нам использовать фиксированный временной анализ для определения активности фермента (данные не показаны). Был обнаружен только продукт 3Z-PΦB, и активность была выражена как интегрированная площадь под пиком 3Z-PΦB, обнаруженным при 380 нм (Wu et al., 1997). Основываясь на стандартизации следов ВЭЖХ (данные не показаны), мы оцениваем минимальную скорость оборота овсяной PΦB-синтазы как 106 мин -1 .

Для изучения Fd-зависимости PΦB-синтазы сравнивали коммерчески доступные препараты Fd из шпината ( Spinacea oleracea ), Porphyra umbilicalis , Spirulina sp. И Clostridium pasteurianum . Все препараты Fd, за исключением того, что из C. pasteurianum , единственный 4Fe-4S Fd, могут поддерживать восстановление bv до 3Z-PΦB. Кинетические данные для Fd шпината были построены с использованием методов Лайнуивера-Берка (1 / v по сравнению с 1 / [Fd]) и Иди-Скэтчарда (v / [Fd] по сравнению с v) для получения оценки K м и В макс .График Лайнуивера-Берка показан на рисунке 6. Исходя из среднего значения этих двух анализов, кажущееся значение K мкм PΦB-синтазы для шпината Fd составляло 3,5 мкм. Модель V max для PΦB-синтазы оценивается как 3,3 AU min -1 . Когда кинетические данные были построены с использованием метода Иди-Скэтчарда, данные, по-видимому, отклоняются от линейности при более низких концентрациях Fd. Этот результат может быть обусловлен сложной смесью для анализа, необходимой для анализа PΦB-синтазы, и, в частности, дифференциальным сродством Fd шпината к Fd: NADP + оксидоредуктазе (FNR) и PΦB-синтазе овса.Видимое K m для P. umbilicalis Fd составляло 1,2 мкм, что намного ниже, чем у шпината Fd, тогда как кажущееся значение V max при 2,0 AU min -1 было немного ниже, чем для шпината. Для Spirulina sp. Fd наблюдаемые значения были несколько выше, чем у P. umbilicalis Fd, но ниже, чем у шпината Fd. Видимое K м для Spirulina sp.Fd составлял 1,8 мкм, а видимое значение V max составляло 3,91 а.е. min -1 , что намного ближе к таковому для шпината (графики не показаны).

Рис.6.

Определение кинетических констант PΦB-синтазы со шпинатом Fd. Данные были нанесены на график и проведена линейная регрессия с использованием Kaleidagraph 3.0. Данные были построены с использованием метода Лайнуивера-Берка. Перехват y составляет 0,27 мин AU −1 , что дает V макс. из 3,7 а.е. мин. −1 .Пересечение x составляет -0,24 мкм. −1 , что дает кажущееся K м 4,1 мкм. R = 0,99.

Также были проведены эксперименты по оценке сродства PΦB-синтазы к BV. Эти измерения показывают, что испытанные концентрации (> 3,3 мкм), предел практического обнаружения с помощью нашей аналитической системы ВЭЖХ, значительно превышали K m для биливердина (данные не показаны). Никакой разницы в образовании продукта не наблюдалось при всех испытанных концентрациях BV; следовательно, K m для BV представляется субмикромолярным.

ОБСУЖДЕНИЕ

Используя сочетание методов осаждения, адсорбционной хроматографии и электрофоретики, PΦB-синтаза из этиопластов овса была очищена более чем в 50 000 раз до почти гомогенности. Это позволило нам впервые изучить биохимические свойства этого фермента из природного источника. Поскольку ген, кодирующий синтазу PΦB HY2 , был недавно клонирован из двудольных видов Arabidopsis (Kohchi et al., 2001), выделение гомологичных генов у овса облегчит прямые сравнения между природными и рекомбинантными синтазами PΦB.Детальное понимание биохимических свойств этого фермента должно дать представление о роли PΦB-синтазы в регуляции светочувствительности in situ.

Наши результаты показывают, что PΦB-синтаза является ферментом с низким содержанием в овсе и относительно высокой скоростью оборота. Низкая экспрессия PΦB-синтазы подчеркивается отсутствием клонов кДНК для HY2 (или HY2 -связанных) генов в базах данных экспрессируемых растениями последовательностей тегов (Kohchi et al., 2001).Минимальная скорость оборота PΦB-синтазы овса была оценена как 106 мин -1 , что аналогично скорости оборота НАДФН-зависимой BV-редуктазы крысы, как сообщается, 102 мин -1 (Kutty and Maines, 1981). Обе биливердинредуктазы обладают значительно более высокой скоростью обмена, чем НАДФН-зависимые гемоксигеназы млекопитающих, т.е. 2,4 мин -1 и 0,73 мин -1 для соответствующих ферментов крысы и человека (Yoshida and Kikuchi, 1979; Wilks et al. ., 1996) и Fd-зависимой гемоксигеназы HO1 из Synechocystis sp.PCC6803, то есть 0,009 мин -1 (Cornejo et al., 1998). По этим оценкам, гемоксигеназа может ограничивать скорость образования PΦB в растениях. Однако это будет зависеть от относительных уровней активности ферментов гемоксигеназы и PΦB-синтазы.

На основании GFC и SDS PAGE, овсяная PΦB-синтаза ведет себя как мономер с молекулярной массой субъединицы 29 кДа. Это похоже на предсказанную молекулярную массу 33 кДа для синтазы PΦB арабидопсиса, которая кодируется локусом HY2 (Kohchi et al., 2001), а также к молекулярному размеру субъединицы др. Недавно описанных Fd-зависимых билинредуктаз (Wüthrich et al., 2000; Frankenberg et al., 2001). В настоящем исследовании, однако, мы наблюдали два вида PΦB-синтазы из этиолированных проростков овса с различными pI. Это предполагает посттрансляционный процессинг (например, протеолиз, фосфорилирование и т. Д.) Фермента овса, но не исключает возможности наличия нескольких генов. Поскольку овес сорта Garry является гексаплоидным видом, что, вероятно, объясняет присутствие нескольких генов фитохрома А (Hershey et al., 1985), вполне разумно, что PΦB-синтаза кодируется множеством генов овса. Это контрастирует с Arabidopsis, чей геном содержит только один ген синтазы PΦB, HY2 (Kohchi et al., 2001).

Овсяная PΦB-синтаза имеет кажущуюся K м для шпината Fd 3 мкм. Хотя K m для Fd овса, по-видимому, не сильно отличается, эти измерения показали сложную кинетику, возможно, из-за использования FNR двудольных растений для уменьшения Fd однодольных.Слабое сродство к Fd, вероятно, объясняет неспособность этого фермента связываться с аффинными колонками Fd-агарозы шпината, методология, которая успешно использовалась для очистки Fd-зависимых билинредуктаз из красной водоросли C. caldarium (Beale и Cornejo, 1984, 1991a, 1991b). Настоящие исследования показывают, что PΦB-синтаза овса также может использовать 2Fe-2S Fds из видов водорослей P. umbilicalis и Spirulina sp., Тогда как 4Fe-4S Fd из Clostridium pasteurianum не поддерживает снижение BV.Однако мы не считаем, что нижний K м. значений, определенных для P. umbilicalis и Spirulina sp. ФД значительны. Более точное определение K m (Fd) необходимо дождаться разработки более прямого метода снижения Fd, поскольку использование системы регенерации FNR и NADPH усложняет анализ. Хотя могут использоваться химические восстановители, такие как метилвиологен, будут применяться электрохимические методики из-за возможных побочных реакций химических восстановителей с субстратами и продуктами билина.

Несколько ключевых аспектов активности PΦB-синтазы ждут дальнейшей характеристики. В частности, точное определение сродства к билину потребует разработки непрерывных, более чувствительных методик анализа. Наши исследования показывают, что модель K м для BV субмикромолярный; однако анализ ВЭЖХ не позволяет проводить точные измерения в этом диапазоне. Предварительные эксперименты показывают, что BV образует стабильный комплекс с рекомбинантным HY2 в отсутствие Fd (N. Frankenberg и J.К. Лагариас, неопубликованные данные). Поскольку не ожидается, что концентрация BV в растительных клетках достигнет микромолярного уровня, высокое сродство к bv может быть необходимо для адекватного синтеза PΦB. Также возможно, что PΦB-синтаза образует комплекс с гемоксигеназой в пластидах растений, тем самым передавая BV на PΦB-синтазу без его высвобождения. Эти вопросы станут предметом будущих исследований семейства ферментов Fd-зависимой билинредуктазы.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Реактивы

Реагент чистоты или более качественные химикаты, полученные от Sigma Chemical Company (St.Louis) или Fisher Scientific (Питтсбург), если не указано иное. Растворители для ВЭЖХ были получены от Fisher Scientific. Трифторуксусную кислоту и 4-метилморфолин перед использованием перегоняли. Все вспомогательные ферменты и белки были получены от Sigma или в качестве подарка (как указано). Хроматографические смолы были получены от Bio-Rad (Геркулес, Калифорния), Sigma, Amersham Pharmacia Biotech, Phenomenex (Торренс, Калифорния) или Whatman (Кент, Великобритания). Картриджи Sep-Pak были получены от Waters Chromatography (Милфорд, Массачусетс).Овес ( Avena sativa L. cv Garry) был получен от компании Maine Potato Growers (Presque Island, ME). Fd был получен коммерчески (Sigma), очищен от шпината ( Spinacea oleracea ; Buchanan and Arnon, 1971) или был получен в очищенной форме в качестве подарка от Ричарда Малкина (Калифорнийский университет, Беркли). BV был синтезирован из билирубина IXα, как описано ранее (McDonagh and Palma, 1980). Перекристаллизованный BV использовали непосредственно после синтеза или дополнительно очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ.Очищенный BV растворяли в Me 2 SO перед использованием и количественно определяли с помощью A 377 после разбавления аликвоты 2% (об. / Об.) HCl в метаноле с использованием молярного коэффициента поглощения 66,2 мм −1 см −1 (McDonagh, Palma, 1980).

PΦB Очистка синтазы

Семена овса (200 г) пропитывали раствором CaCl 2 (0,6 г л -1 ) в дистиллированной воде при 4 ° C в течение 24 ч. Раствор для набухания декантировали и семена оставляли при 4 ° C еще на 24 часа.Семена высаживали на покрытый марлей вермикулит, покрывали фольгой и помещали в темную камеру для выращивания при 24 ° C. Этиолированные проростки восьмидневного возраста собирали ножницами при безопасном зеленом освещении, переносили в блендер Waring из нержавеющей стали при 4 ° C, содержащий 1 л буфера для гомогенизации {500 мМ сорбита, 50 ммMOPS [3- ( N -морфолино) пропансульфоновая кислота] / КОН [pH 8,0], 1 мМ MgCl 2 и 1% [об. / об.] 2-меркаптоэтанола} на кг ткани и гомогенизировали с помощью четырех-пяти 5-секундных импульсов на низком уровне.Гомогенаты фильтровали через четыре слоя марли и два слоя Miracloth (Calbiochem, Сан-Диего). Фильтрат центрифугировали в течение 1 мин при 7500 об / мин в роторе GSA при 4 ° C. Гранулы, содержащие пластиды, осторожно ресуспендировали примерно в одной двадцатой части (примерно 100 мл на 2 кг овса) ледяного буфера для гомогенизации, содержащего 0,2% (мас. / Об.) БСА (фракция V, тепловой шок) и не содержащего 2-меркаптоэтанол. Ресуспендированные гранулы центрифугировали в течение 1 мин при 1000 об / мин в роторе GSA.Супернатанты переносили в свежий центрифужный флакон и центрифугировали в течение 2 мин при 4000 об / мин в роторе GSA. Осадки, содержащие мягкие пластиды, сохраняли, а декантированные супернатанты повторно центрифугировали в течение 2 мин при 4000 об / мин в роторе GSA.

Гранулы этиопласта из последних двух стадий центрифугирования ресуспендировали в ледяном буфере для ресуспендирования пластид (0,5 мксорбитола, 100 мМ фосфата калия [pH 7,3], 2 мМ ЭДТА, 2 мМ EGTA, 1 мМфенилметилсульфонилфторид, 2 мкМ лейпептина и 5 мМ натрия аскорбата) в общем объеме, равном 1 мл на 100 г исходной сырой массы ткани.Объединенные этиопласты немедленно разбавляли 10 объемами ледяного буфера для лизиса пластид (100 мМ фосфат калия [pH 7,3], 2 мМ ЭДТА, 2 мМ EGTA, 1 мМфенилметилсульфонилфторид, 2 мкМ лейпептина и 5 мМ аскорбата натрия), инкубировали на льда при перемешивании в течение 10 мин и ультрацентрифугировали при 105000 г в течение 1 ч в препаративном роторе ультрацентрифуги Тип 35 при 4 ° C. Супернатанты (т.е. лизаты растворимых белков) концентрировали до 0,1 × 0,2 × исходного объема (т.е. между 10 и 20 мл кг -1 исходного материала) с использованием ячейки для ультрафильтрации под давлением Amicon с промытой мембраной YM10.

К концентрированному лизату добавляли кристаллический сульфат аммония для получения 50% насыщения [291 мг (NH 4 ) 2 SO 4 мл -1 ], и смесь перемешивали в течение ночи при 4 ° C. После центрифугирования с ротором SS34 при 10000 g в течение 25 минут фракцию супернатанта переносили в свежую центрифужную пробирку и добавляли дополнительный твердый сульфат аммония до 70% насыщения [125 мг (NH 4 ) 2 SO 4 мл -1 ].Эту смесь инкубировали при перемешивании от нескольких часов до ночи при 4 ° C, и от 50% до 70% ASP собирали центрифугированием с ротором SS34 при 10000 g в течение 25 минут. Хорошо дренированный 50-70% ASP растворяли в 2 мл 20 мМ ТЭА / КОН (pH 7,5) на кг исходного материала, переносили в диализный мешок от 12000 до 16000 MWCO и диализовали в течение ночи против 100 объемов 20 мм. TEA / KOH и 60 мМ KCl (pH 7,5).

Диализированные фракции от 50% до 70% ASP загружали в систему Pharmacia THC, состоящую из трех различных картриджей Pharmacia HiTrap объемом 1 мл, HiTrapQ, HiTrapSP и HiTrapBlue, которые были предварительно уравновешены 20 мМ TEA / HCl-KOH и 60 мМ KCl (pH 7.5) с использованием Dionex BioLC. Скорость потока для всего предварительного уравновешивания, загрузки, промывки и элюирования составляла 1 мл мин. -1 . Тандемную колонку HiTrap промывали от пяти до 10 объемов уравновешивающего буфера до тех пор, пока базовая линия не стабилизировалась. , , после чего колонка была разобрана и картридж HiTrapBlue снова подсоединен. Картридж HiTrapBlue элюировали линейным градиентом 10 мл от 0,06 до 1 м KCl в 20 мМ TEA / HCl-KOH, pH 7,5 (10 мл) с последующим линейным градиентом 5 мл от 1 до 2 м KCl на 20 мм. TEA / HCl-KOH, pH 7.5. Собирали фракции (1 мл) и анализировали активность синтазы PΦB с использованием сопряженного анализа, описанного ниже, и объединяли активные фракции.

Объединенные фракции HiTrapBlue заменяли буфером на 10 мМ фосфата калия, 10% (об. / Об.) Глицерина (pH 7,3) с использованием центрифужного фильтра Millipore Ultrafree 4 с мембраной Biomax 10 кДа NMWCO. Затем обессоленную фракцию загружали в 1-мл гидроксиапатитовый картридж Bio-Rad EconoPac CHT-II, который был предварительно заправлен 400 мм фосфатом калия, 10% (об. / Об.) Глицерином (pH 7.3) и уравновешивают 10 мМ фосфатом калия, 10% (об. / Об.) Глицерином (pH 7,3). Колонку элюировали 10-объемным линейным градиентом от 10 до 400 мМ калий-фосфатного буфера (pH 7,3). Скорость потока составляла 0,5 мл мин. -1 , собирали фракции по 0,5 мл. Колоночные фракции анализировали на активность PΦB-синтазы с использованием сопряженного анализа, описанного ниже, и активные фракции объединяли.

Фракцию CHT-II концентрировали до менее чем 50 мкл с использованием центрифужного фильтра Millipore Ultrafree 4 с мембраной Biomax 10 кДа NMWCO.Концентрированная фракция хроматографировалась при 4 ° C в системе Pharmacia SMART с использованием гель-фильтрационной колонки Superdex 200 3,2 / 30, предварительно уравновешенной 25 мМ TES / KOH, 100 мМ KCl и 10% (об. / Об.) Глицерина (pH 7,3). при скорости потока 30 мкл мин -1 . Элюент колонки контролировали при 280 нм. Фракции колонки анализировали на активность синтазы PΦB с использованием комбинированного анализа. Для определения относительной молекулярной массы PΦB-синтазы использовали стандарты молекулярной массы Bio-Rad.

Фракции колонок для гель-фильтрации, демонстрирующие самые высокие уровни активности, объединяли и наносили на неденатурирующие гели Pharmacia IEF PHAST (pH 6.5–3.0) и сфокусированы на системе Pharmacia PHAST. Сфокусированный гель разрезали на фракции по 2 мм для измерения активности с использованием комбинированного анализа или окрашивали серебром или кислотным фиолетовым 17 (см. Ниже). После окрашивания целевые белки вырезали из геля и переносили в микроцентрифужную пробирку объемом 1,5 мл. К фрагментам геля добавляли равный объем буфера для образца 2 × SDS-PAGE, и образец нагревали до 95 ° C в течение 2 минут. Затем фракции IEF загружали в лунки геля SDS-PAGE с 12,5% (масс. / Об.), Подвергали электрофорезу и гель окрашивали кумасси бриллиантовым синим R-250.

Анализ синтазы PΦB

Для анализа объемом 1 мл анализируемую фракцию белка (10–100 мкл) разводили в 50 мМ TES / KOH (pH 7,3), содержащем регенерирующую систему NADPH (6,5 мМ Glc 6-фосфат, 0,82 мМ NADP + и 1,1 ед. Мл -1 Glc-6-фосфатдегидрогеназа типа XII из дрожжей Torula [EC1.1.1.49]), система, восстанавливающая Fd (4,6 мкм шпината Fd и 0,025 ед. / Мл -1 шпинат FNR [EC 1.18.1.2]) и 10 мкм бычьего сывороточного альбумина (фракция V, тепловой шок).Реакции инициировали добавлением 10 мкл BV в Me 2 SO с получением конечной концентрации BV в анализе 5 мкМ. Анализы инкубировали на водяной бане при 28 ° C при безопасном зеленом освещении или при приглушенном комнатном освещении в течение 30 минут или, как указано. Анализы останавливали, помещая их на лед. Для анализов интактных пластидных фракций или мембранных фракций анализы осветляли центрифугированием при 12000 g в течение 15 минут при 4 ° C перед обработкой. Смеси для анализа PΦB-синтазы анализировали либо количественно с помощью ВЭЖХ, либо качественно после добавления рекомбинантного апофитохрома и разностной спектроскопии (см. Ниже).

Анализ ВЭЖХ

Для количественного анализа активности PΦB-синтазы аналитические смеси загружали в картридж Waters C 18 Sep-Pak Light, предварительно обработанный 3 мл ацетонитрила, 3 мл воды MilliQ и 3 мл 50 мм4-метилморфолина. уксусная кислота (pH 7,7). После загрузки образца Sep-Pak промывали 3 мл смеси 4-метилморфолин / ледяная уксусная кислота (pH 7,7), а затем 3 мл 0,1% (об. / Об.) Трифторуксусной кислоты в воде. Затем Sep-Pak элюировали 2 мл ацетонитрила.Элюат сушили с использованием лиофилизатора Speed-Vac, растворяли в 5 мкл Me 2 SO и разбавляли 200 мкл мобильной фазы ВЭЖХ, ацетон: 20 мМ муравьиная кислота :: 50: 50. Полученные растворы центрифугировали и супернатанты фильтровали через шприц-фильтр из политетрафторэтилена 0,45 мкм перед обращенно-фазовой ВЭЖХ с использованием жидкостного хроматографа Varian 5000. Образцы наносили на аналитическую колонку Phenomenex Ultracarb 5 мкм с октадецилсиланом (20) 4,6 мм × 250 мм с защитной колонкой 4,6 мм × 30 мм с использованием изократической подвижной фазы (ацетон: муравьиная кислота 20 мм :: 50: 50) с расходом 0.8 мл мин. -1 и контролировали при 380 нм с использованием проточного детектора поглощения Varian UV100. Площади пиков были количественно определены с использованием Hewlett-Packard 3365 Chemstation II.

Анализ парного анализа

В некоторых случаях комбинированный анализ использовался в качестве альтернативы анализу ВЭЖХ синтазы PΦB. Как указано Terry and Lagarias (1991), аликвоту рекомбинантного апофитохрома Cph2 из Synechocystis PCC 6803 (Yeh et al., 1997) добавляли к неочищенным смесям для анализа синтазы PΦB.После инкубации в течение 20–30 минут при комнатной температуре и безопасном зеленом свете был снят разностный спектр, как описано ранее, для обнаружения присутствия холофитохрома (Litts et al., 1983).

Анализ белков и электрофорез

Концентрации белка определяли с помощью анализа белка Брэдфорда с BSA в качестве стандарта (Bradford, 1976). Гели SDS-PAGE подвергали электрофорезу (Laemmli, 1970) и окрашивали либо кумасси бриллиантовым синим R-250, либо серебром (Blum et al., 1987) с модификациями, описанными Ausubel et al. (1991). Гели IEF окрашивали либо серебром, либо кислотным фиолетовым 17 (Patestos et al., 1988).

БЛАГОДАРНОСТИ

Мы благодарим докторов наук. Беронде Монтгомери и Николь Франкенберг за критическое прочтение рукописи; Доктор Ник Маршалл, K.C. МакФарланду и доктору Тому Беркельману за полезные научные обсуждения и техническую помощь; и доктора Ричарда Малкина за поставку чистого шпината Fd.

Сноски

  • №1 Работа поддержана фондом U.S. Программа конкурсных грантов Национальной исследовательской инициативы Министерства сельского хозяйства (грант № AMD – 9801768, J.C.L.).

  • ↵2 Нынешний адрес: Amersham Pharmacia Biotech, 654 Minnesota Street, San Francisco, CA 94107–0387.

  • ↵ * Автор, ответственный за переписку, электронная почта jclagarias {at} ucdavis.edu; факс 530–752–3085.

  • Получено 22 декабря 2000 г.
  • Исправление получено 8 марта 2001 г.
  • Принято 25 апреля 2001 г.
.

Уход за рассадой | Как ухаживать за закуской и рассадой

Уход за саженцами
Когда саженец вырастает из почвы, большинство цветоводов вздыхают с облегчением. Закройте глаза, и вы почти сможете увидеть, как растение растет и расцветает в своей полной красоте, производя завидное изобилие цветов или овощей. Как только вы откроете глаза, у вас сразу же начнется новый набор забот: на короткое время вы будете чрезмерно заботиться о новорожденном в помещении, пока погода на улице настигнет ваши мечты.

Семена семейных реликвий - выбор садоводов для сохранения семян из года в год. С этими книгами научиться спасать семена легко и весело. Прежде чем собирать урожай, подумайте, от каких сортов вы, возможно, захотите сохранить семена, чтобы в вашу практику сбора урожая входили растения, выбранные для сбережения семян. Обязательно ознакомьтесь с нашими новейшими пакетами семян, которые уже доступны в Heirloom Organics.Super Food Garden - это самый богатый питательными веществами сад, который вы можете построить, и все, что вам нужно, прямо здесь, в одной упаковке. Genesis Garden - очень популярное собрание библейских садов. Сад Трех сестер был первым примером посадки компаньонов в культуре коренных американцев. Ознакомьтесь со всеми нашими новейшими предложениями по упаковке семян в нашем магазине.

Тонкие саженцы по мере необходимости
Растения в вашем саду не любят тесниться. То же самое и со своими саженцами, которым нужно все солнце и питательные вещества, которые они могут получить.Возможно, вы захотите на время оставить несколько дополнительных растений, так как уровень смертности саженцев может быть высоким.

Дайте им побольше света
Как только новорожденный саженец начинает прорастать, он ищет света. Вашему новорожденному требуется как можно больший и прямой источник света. Размещение его у окна с южной экспозицией - первый шаг. Но одного этого может оказаться недостаточно, чтобы саженец вырос здоровым и сильным. Во-первых, весной солнце не встает так долго, как летом.Во-вторых, есть много дождливых весенних дней с небольшим количеством прямых солнечных лучей или без них. Вам также следует приобрести искусственную лампу для выращивания и размещать под ней саженцы в пасмурные дни и ночью.

Поддерживайте рассаду во влажном состоянии.
Поливайте рассаду каждые пару дней. Не замачивайте почву каждую ночь. Чрезмерно влажная почва способствует развитию болезней. Дайте почве немного подсохнуть сверху, затем тщательно полейте. Полив снизу предпочтительнее.Если у вас есть лоток для семян, добавьте воды на дно лотка. Почва поглотит его через нижние отверстия в вашем контейнере ... у вашего контейнера есть отверстия в дне, не так ли!?!

Подкормить саженцы
Саженец не нуждается в большом количестве дополнительных питательных веществ в первые несколько дней жизни. Начальная почвенная смесь обычно содержит сбалансированную формулу питательных веществ, в которых нуждаются саженцы. Через несколько дней полезно добавить в воду немного жидких удобрений, но не нужно давать им полную силу.

Если корни начинают выходить из-под дна горшка, пора высаживать рассаду на открытом воздухе, если позволяет погода. Если все еще слишком прохладно, держите дно лотка влажным или насыпьте на дно лотка немного земли. Или пересадите рассаду в горшок побольше. Большинство растений не любят быть привязанными к корням.

Защита от длинноногих растений
Сеянцы становятся длинноногими, когда их основной стебель или стебель вырастают высокими и тонкими и с трудом поддерживают структуру листьев.Это вызвано недостаточным солнечным светом и защищенной окружающей средой. В помещении они не испытывают воздействия ветра, и им не нужно создавать структуру для защиты от него. Большинство саженцев не испытывают даже легкого ветра. При пересадке на открытом воздухе «длинноногие» растения могут быть повреждены или сломаны ветром.

Совет: Возьмите руку или пару листов газеты и обмахивайте растения несколько раз в день. Вы даже можете слегка почистить верхушки растений, проводя щеткой взад и вперед в разных направлениях.Вы можете заметить, что растения на какое-то время замедляются. На самом деле они делают более прочный стебель или стебель.

Защита от болезни «Затухание»
Те из нас, кто выращивал рассаду в помещении в течение любого количества лет, знают, что такое болезнь «Затухание». Это белая плесень, которая образуется в верхней части почвы. Болезнь демпфирования процветает в холодную влажную сырую погоду и при небольшом солнечном свете. Быстро разрастается по почве и увядает саженец.Уберите его среду обитания, и болезнь не сможет выжить. А вот растениям нравятся прямо противоположные условия. Чем больше вы создадите идеальные условия для своих растений, тем больше вероятность того, что вы избежите болезни демпфирования и других проблем с плесенью и грибком.

Если у вас возникнут проблемы, не теряйте надежды. Вот несколько вещей, которые вы можете сделать, чтобы свести к минимуму или устранить проблемы, связанные с заболеваниями:

  • Во-первых, по возможности поставьте растение на прямой солнечный свет.
  • Прекратите полив, пока поверхность не станет очень сухой.
  • Вода только снизу.
  • Соскребите с почвы как можно больше плесени.
  • Перемешайте верхнюю часть почвы, не трогая корни. Это также ускорит высыхание.
  • Добавьте немного почвы, хотя это может дать или не дать результатов.
  • Увеличьте циркуляцию воздуха в помещении.Вы можете аккуратно продуть подносы с растениями воздухом с помощью небольшого вентилятора.

Не сажайте семена в подвале и не оставляйте их там на пару дней. Хотя лотки удобно убрать, это идеальная питательная среда для Damping Off Disease.

Что такое болезнь подавления?
Где-то в воздухе вашего дома таятся споры грибка самого страшного из болезней растений для тех из нас, кто сажает растения в закрытом помещении для пересадки на открытом воздухе в конце сезона.

Болезнь демпфирования - очень распространенная проблема болезней растений. Мы боимся этого, потому что это губительно для наших молодых саженцев и весьма вредно для нашего весеннего духа. Потерять рассаду так рано в новом году садоводства просто душераздирающе, особенно если это особые семена. Это приводит к пересадке и задерживает начало сезона садоводства.

Если вы выращиваете комнатные растения ранней весной, вы, вероятно, когда-то испытали это.Обычно мы думаем о болезни демпфирования как о проблеме комнатных растений. Но это также происходит и на открытом воздухе. У нас меньше шансов распознать это на открытом воздухе, поскольку гибель растений весной может быть объяснена рядом причин.

А теперь хорошие новости .... Damping Off Disease как угроза для ваших саженцев может быть сведена к минимуму. У нас есть много советов и идей, которые помогут бороться с этим врагом государства.

Причины болезней
Болезнь Damping Off развивается в прохладных или холодных, темных или облачных, влажных или сырых условиях.Болезнь передается воздушно-капельным путем и может очень быстро передаваться от одного семенного лотка к другому.

Споры грибов укореняются в вашей почве и быстро распространяются по семенному лотку, с легкостью перепрыгивая на другие лотки. Это губительно для молодых всходов, поскольку они срезаются на уровне почвы.

Лечение
Профилактика, как и другие болезни растений, является лучшим средством лечения. Следуйте рекомендациям и рекомендациям, приведенным ниже. Если болезнь Damping Off все же завладела вашими семенными лотками, действуйте немедленно.Удалите больные участки, чтобы свести к минимуму распространение. Если он затронул значительное количество растений, пересаживайте в новый грунт и чистые емкости. Не используйте повторно почву. Либо используйте новые емкости, либо стерилизуйте те, которые вы использовали. Мы рекомендуем новые контейнеры.

Борьба с болезнью
Борьба с болезнью - это вопрос удаления среды, в которой процветает болезнь Демпфинга. Вот основные правила, которые можно и нельзя:

Do's
До купить посевной стерилизованный стартовый грунт.
Не используйте ли чистые стерилизованные контейнеры.
Не используйте ли чистые стерилизованные контейнеры.
Do обеспечивают хорошую циркуляцию воздуха.
Сделайте используйте небольшой вентилятор и направьте легкий ветерок через комнату.Важное слово здесь - «нежный»
Сделайте тонких саженцев для увеличения циркуляции воздуха.
Обеспечивает ли как можно больше солнечного света.
Do дайте поверхности почвы просохнуть между поливами.Полив снизу предпочтительнее.
Сделайте перемешайте верхнюю часть почвы вокруг саженцев.
Нельзя
Не оставляйте лотки с рассадой в подвале.Подвалы - прекрасное место для размножения.
Не надводные растения.
Не используйте удобрения для новых саженцев.
Не используйте крышки лотков.Хотя их использование является популярной практикой, они повышают уровень влажности и стимулируют рост болезней.
Знаете ли вы? Азот в удобрении может способствовать быстрому развитию болезни демпфирования.

Другие советы и предложения:
Считается, что замачивание семян в небольшом количестве воды и зубчика измельченного чеснока предотвратит болезнь.

Некоторые люди предлагают опрыскивать растение ромашковым чаем в качестве профилактики.

Некоторые рекомендуют укладывать каминную золу поверх почвы.

Корица также действует как фунгицид.

Мох сфагнум тонко рассыпается по поверхности почвы.

.

Саженец дуба - OSRS Wiki

Из старой школы RuneScape Wiki

Перейти к: навигация, поиск В RuneScape Wiki также есть статья: rsw: Саженец дуба.

Без воды

Саженец дуба
Выпущено 11 июля 2005 г. (Обновление)
Члены Да
Элемент Quest №
Свойства
Для продажи Нет
Оборудованный Нет
Штабелируемый Нет
Уничтожить Drop
Проверить В этот горшок посеян желудь.
Значения
Стоимость 1 монета
High alch 0 монет
Low alch 0 монет
Вес 0,907 кг
Расширенные данные
Идентификатор позиции 5358
Twisted League Да
Саженец дуба Саженец дуба (w) ? (править) Без воды ? (редактировать) ? (редактировать) Oak seedling.png.

Идеальное время для высадки рассады и молодых растений

Большинству садоводов приходится на собственном горьком опыте узнать, когда лучше всего высаживать саженцы, выращенные в помещении или в теплице. В первый год некоторые из их растений будут успешными, в то время как другие опрокинутся и умрут без видимой причины, и может пройти несколько сезонов со всеми их погодными изменениями, прежде чем станет очевидным, почему они потерпели неудачу. Жалко, потому что небольшой хороший совет может избавить от многих разочарований и значительно повысить уровень успеха в саду.Имея это в виду, вот мое руководство по принятию решения, когда горшечные растения должны покинуть дом и поселиться на ваших грядках.

Чтобы проиллюстрировать проблему, взгляните на картинку ниже, на которой показаны два растения томата из моей теплицы в этом году. Оба были выращены одновременно, выращены в одинаковых условиях из одного пакета семян с использованием одного и того же почвенного компоста. Растение справа было перенесено на грядку теплицы в оптимальное время, в то время как растение слева держалось в горшке слишком долго (я часто в конечном итоге выращиваю больше растений, чем у меня есть место!) Всего за три недели разница в росте и здоровье растений очевидна.Для хорошего роста необходимо высаживать растения на основную грядку с овощами! Однако если пересаживать их слишком рано, вы рискуете повредить их поздними заморозками или задержать их продвижение из-за неблагоприятных погодных условий.

Помидоры в горшке против помидоров в почве

Признаки того, что пора сажать

Выращивание растений в горшках или ящиках для семян немного похоже на поддержание их жизни. Интенсивный уход необходим для того, чтобы все, что обычно есть в саду в естественных условиях (свет, вода, питательные вещества), доставлялось в нужных количествах.Часто требуется дополнительный свет, чтобы предотвратить «длинноногий» рост, полив должен быть ежедневным, и даже хорошая почва для посева семян будет иметь ограниченные запасы питательных веществ, которые в конечном итоге потребуют пополнения.

Вот почему важно следить за этими знаками, чтобы определить, когда растения готовы к переезду:

  • Размер : Как только растение станет шире и примерно в два раза выше горшка, ему будет трудно получить достаточно воды. Вы можете заметить, что почва высыхает быстрее, потому что растение быстрее впитывает воду, и больше влаги будет потеряно через более крупные листья, особенно если оно находится под светом.
  • Почва : Примерно через 8 недель растение использует большую часть питательных веществ из небольшого горшка, и рост может замедлиться.
  • Корни : Держа растение вверх ногами с стеблем между пальцами, вы можете вынуть горшок с растением и осмотреть корни. Если они начинают кружить по краю горшка, значит, растение может «приковаться к горшку» и ему нужно больше места.
  • Листья : Следите за растением и обратите внимание, не начинают ли листья терять нормальный зеленый цвет, скручиваться или опускаться.Пожелтевшие листья указывают на серьезный дефицит питательных веществ, и в идеале вы хотите пересадить растение задолго до этого этапа.

При обнаружении одного из этих знаков пора действовать:

  1. Перенести установку на улицу, если условия подходят (см. Ниже) или
  2. Пересадите растение в горшок большего размера со свежей горшечной почвой, чтобы получить больше питательных веществ, воды и корневого пространства. Это тактика проволочек, необходимая, если вы не можете перенести растение, когда оно будет готово.

Внешние факторы

К сожалению, погода не всегда соответствует тому, когда наши тщательно выращенные растения нужно переносить на улицу. Вот факторы, которые необходимо учитывать:

  • Диапазон температур : Экстремальные температуры вредны для растений, которые привыкли к тщательному регулированию света, тепла и воды. Поэтому лучшее время для пересадки растений не в яркие солнечные дни, когда при ясном небе температура в ночное время обычно резко падает.Когда диапазон температур меньше, лучше выбирать пасмурные пасмурные дни.
  • Ветер и выдержка : Растения, выращенные в помещении или под навесом, не «укрепятся» перед движением воздуха снаружи. Избегайте ветреных дней и открытых участков и не делайте ветрозащитные ограждения вокруг растений (если они не затеняют их). В этом году я потерял несколько бобов, потому что, когда я сажал их, поднялся ветер, и большие листья скручивались с растений на ветру.
  • Переувлажненная тяжелая почва : Если почва переувлажнена, важно отложить посадку, особенно это важно для глинистых почв, так как это лишает корни необходимого им воздуха и может поддерживать слишком низкую температуру почвы.
  • Вредители и хищники : Ранняя весна часто приносит много молодых птиц, жаждущих еды, и они любят верхушки проростков гороха и капусты, поэтому помните об этом и при необходимости защищайте растения. Аналогичным образом, внезапное увеличение численности вредителей, таких как тля, часто наблюдается в конце весны и начале лета.
  • Личное внимание : Никогда не стоит переносить растения, когда вы собираетесь уехать на несколько дней. Намного лучше выбрать время, когда вы будете рядом, чтобы следить за уровнем воды в них и начинать ли на них нападать какие-либо вредители.

Я считаю хорошей идеей вырастить больше растений, чем у меня есть в саду, и воздержаться от посадки при посадке. Это гарантирует, что если поздние заморозки или неожиданные вредители повредят растения, я не потеряю весь урожай. Тем не менее, важно избегать ошибки, заключающейся в том, что эти лишние растения втиснуты в сад, заставляя их слишком много других!

Пересадка молодых растений

По мере того, как ваши растения готовы к выходу на улицу, важно приучить их к внешним температурам.В течение нескольких дней выведите их на улицу, чтобы они подверглись колебаниям температуры и движению воздуха - подробности см. В нашей статье о закаливании растений. Обратите внимание на прогноз погоды, чтобы определить лучшие дни для посадки.

Молодые растения особенно уязвимы для употребления в пищу, поэтому при необходимости защищайте их от птиц или накройте садовым флисом, чтобы не допустить летающих насекомых. Если слизни представляют собой проблему, лучше всего за несколько дней до этого поставить пивные ловушки, так как один слизень может за ночь проглотить целый ряд ценных молодых растений.

При посадке укрепите почву вокруг них и хорошо полейте, чтобы корни оставались влажными. Следите за ними в последующие дни, чтобы выявить проблемы до того, как они разовьются. Когда растения пересаживают, рост обычно замедляется на 1-2 недели, поскольку корни укореняются, после чего они быстро нагоняют.

Пожалуйста, добавьте свои собственные советы, как помочь растениям хорошо переноситься на улицу, добавив комментарий ниже ...

.

Смотрите также